Бактерии, их разнообразие. Строение

Современная классификация (группировка) микроорганизмов была предложена в 1980 г. амери-канским микробиологом Берджи . По этой классификации весь мир микробов делится на три царства: бактерии, грибы, вирусы.

Кто же это такие? Чтобы это выяснить, я обратилась в школьную библиотеку, где наш библиотекарь помогла мне поработать с литературой в поисках ответа.

Название микроорганизмы произошло от латинского слова микрос – малый. Следовательно, микроорганизмы (микробы) - одноклеточные организмы размером менее 0,1 мм., которые невозможно увидеть невооруженным глазом.

Появились на Земле за много миллиардов лет до появления человека! Они имеют разнообразную форму. Некоторые неподвижны, а у других имеются реснички или жгутики, при помощи которых они передвигаются.

Большинство микробов дышат воздухом - это аэробы .
Для других воздух вреден - это анаэробы .

В мировой классификации микробы делят на патогенные (болезнетворные) и непатогенные микробы . К ним относятся бактерии, вирусы, низшие микроскопические грибы (мукор, дрожжи) и водоросли, простейшие ( ).

Приложение 1

Классификация микроорганизмов

Из уроков окружающего мира я узнала, что бактерии, ранее считавшиеся микроскопическими растениями, сейчас выделены в самостоятельное царство Бактерии – одно из четырех в нынешней системе классификации наряду с растениями, животными, грибами .

(др. греч. - палочка) - это одноклеточные микроорганизмы, характеризующиеся клеточными сходствами, имеющие разнообразную форму: шаровидные - кокки , палочковидные - бациллы , изогнутые - вибрионы , спиральные - спириллы , в виде цепочки - стрептококки , в виде гроздей - стафилококки ( ).

Приложение 2

Классификация бактерий по форме

Название бактерии	Форма бактерии	Изображение бактерии
Кокки	Шарообразная
Бацилла	Палочковидная
Вибрион	Изогнутая, в виде запятой
Спирилла	Спиралевидная
Стрептококки	Цепочка
Стафилококки	Грозди
Диплококки	Две круглые бактерии, заключенные в одну капсулу

В настоящее время описано около десяти тысяч видов бактерий. Изучением бактерий занимается раздел микробиологии бактериология .

(лат. virus яд) - самые примитивные организмы на земле размером 20-300 нм. Воспроизводятся только внутри живых клеток организма. Не имеют клеточного строения. В свободном состоянии в них не происходят никакие обменные процессы.

(низшие) это одноклеточные грибы. К таким грибам относится известная всем белая плесень (гриб мукор ). Такой гриб часто развивается на хлебе или овощах и выглядит сначала как вата – белое пушистое вещество, которое постепенно превращается в черное. Несмотря на то, что в быту мукор вызывает порчу, в природе он играет полезную функцию, разлагая отмершие организмы.

Особую нишу в микробиологических исследованиях занимают - группа одноклеточных грибов, обитающие в жидкой среде, богатых органическими веществами, использующиеся в бродильных процессах.

(цианобактерии ) – тип древнейших крупных бактерий, способных к фотосинтезу, сопровождающемуся выделением кислорода.

– множество разнообразных организмов, тело которых состоит из одной клетки (инфузория, амеба, эвглена зеленая ...).

Таким образом, согласно рассмотренной мной классификации существует огромное количество микроорганизмов, которые существуют, и размножаются в комфортных для каждого вида условиях. Каждый вид микроорганизмов будет зависеть от среды обитания и выполнять определенные функции.

Бактерии относятся к прокариотам – одноклеточным организмам, не имеющим ядра. Их подразделяют на два надцарства: Bacteria и Archaebacteria. Среди последних нет возбудителей инфекционных болезней. На сегодняшний день классификация бактерий базируется на принципах генетической связи.

Надцарство Bacteria образуют следующие организмы:

• тонкостенные (грамотрицательные);
• толстостенные (грамположительные);
• без стенок клетки (микоплазмы).

Внутри надцарства микроорганизмы классифицируются на шесть таксономических групп:

• Класс.
• Порядок.
• Семейство.

Главная группа – это вид. Он представлен как совокупность особей с одинаковым генезисом и генотипом, связанных схожими признаками и отличных от прочих видов.

Наименование вида определяется бинарной номенклатурой (то есть название сформировано из двух слов). Возбудитель сифилиса, например, обозначается как Treponema pallidum. Первая часть наименования обозначает род, указывается с заглавной буквы. Вторая указывает на вид, прописывается с маленькой буквы. Если вид упоминается вторично, наименование рода обозначается начальной буквой (T. padillum).

Самой распространенной считается фенотипическая группировка, включенная в девятое издание Определителя Берджи. Ее принципы базируются на структуре стенок клетки.

Определитель Берджи также классифицирует бактерии по окраске по Граму. Методика Грама – это способ исследования, при котором окрашивание позволяет дифференцировать организмы по биохимическим свойствам стенок их клетки. Метод разработал в 1884 году датский врач Грам.

Крупнейшие группы бактерий в классификации Берджи:

• Грамотрицательные.
• Грамположительные.
• Микоплазмы.
• Археи.

В определителе Берджи описания представлены по группам, включающим семейства, роды и виды. Иногда в группу включаются классы и порядки. Определитель Берджи выделяет 30 групп, включающих патогенные организмы, остальные 5 групп по Берджи не содержат патогенных видов.

В последние годы популярность набирает филогенетическая классификация, которая строится на принципах молекулярной биологии. В 60-е годы прошлого столетия был открыт один из первых способов определения родственных связей по схожести генома – методика сопоставления концентрации гуанина (элемента нуклеиновой кислоты) и цитозина (составляющей ДНК) в макромолекуле ДНК. Идентичные показатели их концентрации не свидетельствуют об эволюционной схожести микроорганизмов, но разница в 10% указывает на то, что бактерии относятся к разным родам.

В 70-е годы разработали еще одну методику, в корне изменившую теорию микробиологии – оценка последовательности генов в 16s рРНК. Посредством данного метода стало возможным выделение нескольких филогенетических группировок микроорганизмов и анализ их взаимосвязи.

Классификация на уровне вида осуществляется с помощью методики ДНК-ДНК гибридизации. Изучение досконально исследованных видов показывает, что 70% степени гибридизации описывают один вид, от 10% до 60% – один род, меньше 10% – различные роды.

Филогенетическая классификация частично копирует фенотипическую. Так, например, грамотрицательные входят и в ту, и в другую. Вместе с тем система грамотрицательных организмов практически полностью видоизменена. Архебактерии определены как независимый таксон высшего звена, некоторые таксономические группировки перераспределены, к одной категории отнесены микроорганизмы с различным экологическим предназначением.

Формы бактерий

Бактерии можно классифицировать, ориентируясь на их морфологию. Один из главных морфологических признаков – форма.

Выделяют несколько разновидностей:

• Шарообразная (кокки, диплококки, сарцины, стрептококки, стафилококки).
• Палочкообразная (бациллы, диплобациллы, стрептобациллы, коккобактерии).
• Витиеватая (вибрионы, спириллы).
• Спиралеобразная (спирохеты – тонкие, удлиненные, извилистые микроорганизмы с множеством завитков).
• Нитчатая.

На рисунке изображены их формы:

• 1 – микрококки;
• 2 – стрептококки;
• 3 – сарцины;
• 4 – бесспоровые палочки;
• 5 – споровые палочки (бациллы);
• 6 – вибрионы;
• 7 – спирохеты;
• 8 – жгутиковые спириллы;
• 9 – стафилококки.

Шарообразные бактерии имеют сферическую форму, также бывают овальные и бобовидные организмы.

Расположение кокков:

• По отдельности – микрококки.
• В паре – диплококки.
• В цепях – стрептококки.
• В форме виноградной лозы – стафилококки.
• В «пакетах» – сарцины.

Чаще всего встречаются палочкообразные бактерии. Палочки собираются поодиночке, в парах (диплобактерии) или в цепях (стрептобактерии). Ряд палочкообразных организмов может при тяжелых условиях формировать споры. Бациллы являются споровыми палочками. Бациллы, похожие на веретено, называются клостридиями.

Витиеватые микроорганизмы имеют форму запятой (вибрионы), тонкой извилистой палочки (спирохеты), также могут иметь несколько завитков (спириллы).

У архебактерий нет пептидогликана (компонента, выполняющего механическую функцию) в стенках клетки. Они обладают специфическими рибосомами и рибосомными РНК (рибонуклеиновая кислота).

Морфология тонкостенных грамотрицательных организмов:

• Шаровидная форма (гонококки, менингококки, вейлонеллы).
• Витиеватая (спирохеты, спириллы).
• Палочкообразная (риккетсии).

Среди толстостенных грамположительных микроорганизмов выделяют:

• Шарообразные (стафилококки, пневмококки, стрептококки).
• Палочкообразные.
• Разветвленные, нитевидные организмы (актиномицеты).
• Булавовидные организмы (коринебактерии).
• Микобактерии.
• Бифидобактерии.

Расположение и количество жгутиков

Морфология включает такой параметр, как месторасположение и количество жгутиков. По данному параметру различают:

• Монотрихи (единственный жгутик на полюсе их клетки).
• Лофотрихи (связка жгутиков на полюсе их клетки).
• Амфитрихи (два пучка жгутиков на их полюсах).
• Перитрихи (большое количество жгутиков по всей бактерии).

Наличие жгутиков свойственно кишечным микробам, холерному вибриону, спирилле, щелочеобразователям.

Расцветка стенок клетки

Окраска бактерий определяется концентрацией пептидогликана. Организмы, для которых характерно высокое содержание пептидогликана в стенках клетки (около 90%), имеют сине-фиолетовую окраску по Граму. Это грамположительные бактерии.

Все остальные бактерии, имеющие в оболочке от 5 до 20% пептидогликана, приобретают розоватую окраску. К ним причисляются грамотрицательные бактерии. Степень толщины пептидогликана у грамположительных организмов в несколько раз выше, чем у грамотрицательных.

Стенки клеток грамположительных организмов также включают полисахариды, тейхоевые кислоты и белки. Грамотрицательные бактерии покрывает внешняя мембрана, состоящая из липополисахаридов и базальных белков.

Расцветка по Граму позволяет классифицировать прокариоты на подкатегории. Толстостенные микроорганизмы из отдела Gracilicutes, протопласты и сферопласты с дефектной стенкой клетки окрашиваются грамотрицательно. Толстостенные бактерии типа Фирмикуты окрашиваются грамположительно.

Классификация по виду дыхания

По виду дыхания различают:

• аэробные;
• анаэробные организмы.

Клетки бактерий способны к дыханию, т. е. в них происходит окисление органических соединений кислородом, в результате чего образуется углекислый газ, вода и энергия. Эти организмы считаются аэробными, поскольку им нужен кислород. Они обитают на поверхности воды и земли, в воздушном пространстве.

Многие микроорганизмы существуют без кислорода, т. е. обходятся без дыхания. К ним относятся бактерии, участвующие в процессе разложения веществ при перегное. Такие организмы являются анаэробными. Дыхание заменяет брожение – разложение органических соединений без кислорода с выработкой энергии. В процессе брожения спирта образуется энергия в 114 кДж (или 27 килокалорий), в результате молочнокислого энергия составляет 94 кДж (или 18 килокалорий). Дыхание бактерий осуществляется в их лизосомах.

Способ питания

Классификация бактерий по типам питания:

• автотрофы;
• гетеротрофы.

Первые обитают в воздухе и используют неорганические вещества для продуцирования органических. Автотрофы используют солнечную энергию (цианобактерии) либо энергию неорганических соединений (серобактерии, железобактерии).

Классификация по ферментам

Ферменты играют важную роль в обменных процессах клетки. Они подразделяются на шесть групп:

• Оксиредуктазы.
• Трансферазы.
• Гидролазы.
• Лигазы.
• Лиазы.
• Изомеразы.

Вырабатываемые ферменты располагаются внутри клетки (эндоферменты) либо выводятся наружу (экзоферменты). Второй тип ферментов участвует в поступлении в клетку углерода и энергии. Большая часть ферментов из группы гидролаз причисляются к экзоферментам. Ряд ферментов (коллагеназа и т. д.) относится к ферментам агрессии. Отдельные ферменты расположены в стенках клетки. Они выполняют транспортную функцию, т. е. переносят в клетку вещества.

Бактерии – это безъядерные одноклеточные микроорганизмы, которые классифицируются по множеству параметров (способы дыхания и питания, строение стенки клетки, форма и т. д.). На сегодняшний день науке известно более 10000 видов бактерий, но предположительно их количество достигает миллиона.

По форме всœе бактерии делятся на 3 группы:

— шаровидные или кокки

— палочковидные или палочки

— извитые формы бактерий.

Кокки имеют округлую, шаровидную, овальную, пламени свечи, ланцетовидную форму и подразделяются на 6 подгрупп исходя из способа соединœения.

1 микрококки;

2 диплококки;

3 тетракокки;

4 стрептококки;

5 стафилококки;

6 сарцины.

Все кокки неподвижны, не образуют спор.

Широко распространены в природе. Входят в состав заквасок кисломолочных. Могут быть болезнетворными (ангина, гонорея, менингит).

Палочковидные бактерии имеют вытянутую форму. Длина больше ширины. Легко меняют свою форму исходя из условий жизни, ᴛ.ᴇ. обладают полиморфизмом. Палочки — наиболее распространенная группа среди всœех бактерий. Могут быть не болезнетворными, но могут вызывать различные заболевания (тиф, дизентерия).

Палочки бывают подвижными и неподвижными образовывать и необразовывать споры. По способности образования споры палочки делятся на три группы:

— бактерии;

— бациллы;

— клостридии.

Извитые формы бактерий делятся на три группы:

1. вибрионы;

2. спириллы;

3. спирохеты.

Все извитые формы болезнетворные.

Строение и функции клеточной оболочки бактерий.

Клеточная оболочка покрывает клетку снаружи. Это плотная, упругая структура, выдерживающая перепад давления, состоящая из двух частей – наружной части, называемой клеточной стенкой и внутренней части – цитоплазматической мембраны (ЦПМ). И стенка и мембрана имеет поры (отверстия) через которые в клетку проходят питательные вещества и удаляются продукты жизнедеятельности. При этом через поры клеточной стенки питательные вещества проходят по молекулярной массе не более 1000, ᴛ.ᴇ. стенка при питании выполняет функции механического сита. Через поры ЦПМ питательные вещества проходят не по массе, а по мере нужнобности, ᴛ.ᴇ. она обладает полупроницаемостью.

Клеточная оболочка выполняет ряд важнейших функций:

1 – поддерживает форму тела;

2 – защищает клетку от внешних воздействий;

3 – участвует в обмене веществ клетки, ᴛ.ᴇ. пропускает питательные вещества и выделяет продукты жизнедеятельности;

4 – участвует в передвижении клетки. Бактерии, лишенные клеточной оболочки теряют подвижность;

5 – участвуют в образовании капсулы.

— Классификация бактерий по форме.

По форме все бактерии делятся на 3 группы: — шаровидные или кокки — палочковидные или палочки — извитые формы бактерий. Кокки имеют округлую, шаровидную, овальную, пламени свечи, ланцетовидную форму и подразделяются на 6 подгрупп в зависимости от способа… [читать подробнее].

Микробы, наиболее часто встречающиеся в процессе приготовления пищи, делят на бактерии, плесневые грибы, дрожжи и вирусы. Большинство микробов - одноклеточные организмы, размер которых измеряется в микрометрах - мкм (1/1000 мм) и нанометрах - нм (1/1000 мкм).

Бактерии - одноклеточные, наиболее изученные микроорганизмы размером 0,4-10 мкм. По форме их делят на кокки - микробы шаровидной формы (микрококки, диплококки, тетракокки, сарци-ны, стрептококки, стафилококки), палочки (одиночные, двойные, цепочки), вибрионы, спириллы и спирохеты (изогнутые и спирально извитые формы). Размеры и форма бактерий могут изменяться в зависимости от различных факторов внешней среды (рис. 3).

Рис. 3. Формы бактерий:

1 - микрококки; 2 - стрептококки; 3 - сарцины; 4 - палочки без спор;

5 - палочки со спорами (бациллы); 6 - вибрионы; 7 - спирохеты;

8 - спириллы.

Бактерии покрыты оболочкой, представляющей собой уплотненный слой цитоплазмы, которая придает клетке форму. Наружный слой оболочки у многих бактерий может ослизняться, образуя защитный покров - капсулу. Основной частью клетки является цитоплазма - прозрачная белковая масса, пропитанная клеточным соком. В цитоплазме находятся ядерное вещество, запасные питательные ве­щества (зерна крахмала, капельки жира, гликоген, белок) и другие клеточные структуры. На поверхности некоторых бактерий (палочковидных) имеются нитевидные образования - жгутики (одиночные, в виде пучка или по всей поверхности), с помощью которых они передвигаются.

Некоторые палочковидные бактерии при неблагоприятных условиях образуют споры (сгущенная цитоплазма, покрытая плотной оболочкой). Споры не нуждаются в питании, не способны размножаться, но сохраняют свою жизнеспособность при высоких температурах, высушивании, замораживании в течение нескольких месяцев (палочка ботулинуса) или даже многих лет (палочка сибирской язвы). Споры погибают при стерилизации (нагревании до 120°С в течение

29 мин). В благоприятных условиях они прорастают в обычную (вегетативную) бактериальную клетку. Спорообразующие бактерии называются бациллами.

Размножаются бактерии путем простого деления. При благоприятных условиях размножение одной клетки протекает в течение 20 -

30 мин. С накоплением вредных продуктов жизнедеятельности бактерий и исчерпанием питательных ресурсов процесс размножения прекращается.

Плесневые грибы- одноклеточные или многоклеточные низшие растительные организмы, в своей жизнедеятельности нуждающиеся в готовых пищевых веществах и в доступе воздуха. Клетки плесневых грибов имеют форму вытянутых переплетающихся нитей - гифов толщиной 1-15 мкм, образующих тело плесени - мицелий (грибницу), состоящий из одной или многих клеток. На поверхности мицелия развиваются плодовые тела, в которых созре­вают споры (рис. 4).

По строению клетки плесневых грибов отличаются от бактериальных клеток тем, что имеют одно или несколько ядер и вакуолей (полостей, заполненных клеточной жидкостью). Размножаются плесневые грибы с помощью гиф и спорами.

Плесневые грибы широко распространены в природе. Развиваясь на пищевых продуктах, они образуют пушистые налеты разного цвета. Плесневые грибы выделяют вещества, придающие пищевым продуктам плесневелый запах и вкус. Они могут развиваться при низкой влажности (15 %), что объясняет плесневение сухофруктов, сухарей,

Рис. 4. Виды плесневых грибов:

1 - пенициллиум; 2 - аспергиллус; 3 - мукор..

при повышенной концентрации соли и кислот (на соленых и кислых продуктах), при низкой температуре, поражая продукты, хранящиеся в холодильниках.

Среди плесневых грибов есть полезные, используемые при производстве сыров («Рокфор», «Камамбер»), лимонной кислоты и ле­карственных препаратов (пенициллин).

Дрожжи - одноклеточные неподвижные микроорганизмы. Клетки дрожжей размером до 15 мкм бывают разной формы: круглые, овальные, палочковидные (рис. 5). Они имеют четко выраженное крупное ядро, вакуоли и различные включения в цитоплазме в виде капелек жира, гликогена и т. д.

Дрожжи размножаются в благоприятных условиях в течение нескольких часов следующими способами: почкованием, спорами (1 - 112 шт. в клетке), делением. Дрожжи широко распространены в природе. Они способны расщеплять (сбраживать) сахара в спирт и углекислый газ. Спиртовое брожение используется в виноделии, хлебопечении и в производстве кисломолочных продуктов (кефира, ку­мыса). Некоторые дрожжи отличаются высоким содержанием белков, жиров, витаминов группы В, минеральных веществ, поэтому при­меняются как пищевой и кормовой продукт.

Классификация бактерий по форме

5. Формы клеток дрожжей:

1 - яйцевидные; 2 - эллипсовидные; 3 - цилиндрические (палочковидные);

4 - шаровидные; 5 - лимонообразные; 6 — дрожжи, размножающиеся делением и спорами.

Вирусы — частицы, не имеющие клеточного строения, обладающие своеобразным обменом веществ, способностью к размножению. Они бывают круглой, прямоугольной и нитевидной формы, размером от 8 до 150 нм. Их можно увидеть только с помощью электронных микроскопов.

⇐ Предыдущая123456789Следующая ⇒

Дата публикования: 2015-11-01; Прочитано: 1474 | Нарушение авторского права страницы

Studopedia.org — Студопедия.Орг — 2014-2018 год.(0.001 с)…

Характеристика плесневых грибов (часть 1)

Плесневые грибы, или плесени, как их принято называть, распространены повсеместно. Они относятся к различным классам грибов. Все они являются гетеротрофами и, развиваясь на пищевых продуктах (фруктах, овощах и других материалах растительного или животного происхождения), вызывают их порчу.

Классификация бактерий

На поврежденной поверхности появляется пушистый налет, первоначально белого цвета. Это - мицелий гриба. Вскоре налет окрашивается в различные цвета от светлого до темного оттенков. Эта окраска образуется массой спор и помогает распознавать плесени.

Из плесеней в виноградном сусле чаще всего встречаются Мuсоr (мукор), Penicillium (пенициллиум) и Aspergillus (аспергиллус).

Мuсоr относится к семейству мукоровых класса фикомицетов подкласса зигомицетов. У этой плесени одноклеточный сильно разветвленный мицелий, бесполое размножение осуществляется при помощи спорангиоспор, а половое — зигоспорами. У мукора спорангиеносцы одиночные, простые или ветвящиеся (рис.21).

Рис.21. Phicomycetes:
а — Мuсоr; б — Rizopus.

К этому же семейству относится и род Rizopus (ризопус), отличающийся от мукора неветвистыми спорангиеносцами, расположенными кустиками на особых гифах — столонах.

Многие мукоровые грибы способны вызывать спиртовое брожение. Некоторые мукоровые грибы (Мuсоr racemosus), развиваясь в сахаристых жидкостях, образуют при недостатке воздуха дрожжеподобные клетки, размножающиеся почкованием, вследствие чего их называют мукоровыми дрожжами.

Плесени Penicillium (рис.22) и Аsреrgillus (рис.23) относятся к плодосумчатым грибам класса Ascomycetes. У них многоклеточный мицелий, размножаются преимущественно конидиоспорами, окрашенными в различные цвета и образующимися на характерной формы конидиеносцах. Так, у Penicillium конидиеносец многоклеточный, ветвистый, имеющий вид кисточек, поэтому его называют еще кистевиком.

Рис.22. Penicillium:
1 — гифа; 2 — конидиеносец; 3 — cтepигмы; 4 — конидиоспоры.

Рис.23. Aspergillus niger (конидиеносец):
1 — стеригмы; 2 — конидии.

У Aspergillus конидиеносец одноклеточный, со вздутой верхушкой, на поверхности которой расположены радиально вытянутые клеточки — стеригмы с цепочками конидиоспор.

Плодовые тела у этих грибов образуются редко и имеют вид мелких шариков, внутри которых беспорядочно расположены сумки со спорами.

Penicillium и Aspergillus являются возбудителями порчи пищевых продуктов и органических материалов. Развиваясь на поверхности сусла, на бочках, на стенках подвалов, они являются опасными врагами винодельческого производства. Они могут проникать в бочковую клепку на глубину 2,5 см. Тара, зараженная плесенью, придает винам неприятный и почти неустранимый плесневый тон.

Некоторые виды этих грибов имеют техническое значение. Так, Penicillium notatum (пенициллиум нотатум) используется для получения антибиотика — пенициллина. Различные виды Aspergillus, Penicillium, Botrytis и некоторых других грибов используют для приготовления ферментных препаратов (нигрин, аваморин). Вид Aspergillus niger (аспергиллус нигер) применяют для производства лимонной кислоты, а Aspergillus oryzae (аспергиллус оризе) — в производстве японского национального спиртового напитка из риса — сакэ. Оба эти вида обладают способностью осахаривать крахмал и могут использоваться в производстве спирта вместо солода.

часть 1 >>> часть 2 >>> часть 3

1 2 3 4 5 6 7 8 9

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

1. Предмет, задачи, разделы микробиологии, ее связь с другими науками.

Микробиология - наука о живых организмах, невидимых невооруженным глазом (микроорганизмах): бактерии, архебактерии, микроскопические грибы и водоросли, часто этот список продляют простейшими и вирусами. В область интересов микробиологии входит их систематика, морфология, физиология, биохимия, эволюция, роль в экосистемах, а также возможности практического использования.

Предметом изучения микробиологии являются бактерии, плесневые грибы, дрожжи, актиномицеты, риккетсии, микоплазмы, вирусы. Но поскольку вирусы абсолютно не могут существовать без живого организма, изучением их занимается самостоятельная наука, называемая «вирусологией».

Цель медицинской микробиологии - изучение структуры и свойств патогенных микробов, взаимоотношения их с организмом человека в определенных условиях природной и социальной среды, совершенствование методов микробиологической диагностики, разработка новых, более эффективных лечебных и профилактических препаратов, решение такой важной проблемы, как ликвидация и предупреждение инфекционных болезней.

Разделы микробиологии: бактериология, микология, вирусология и т. д.

• *Общая микробиология – изучает закономерности жизнедеятельности всех групп микроорганизмов, выясняет роль и значение в природном круговороте.
• *Частная микробиология – изучает систематику бактерий, возбудителей отдельных заболеваний и методы их лабораторной диагностики.

В составе обширной науки микробиологии выделяют разделы:

• *Сельскохозяйственная микробиология изучает роль и формирование структуры почвы и ее плодородия, роль бактерий в питании растений.

  Разрабатывает методы и способы использования бактерий для удобрения почв и консервирования кормов.

• *Ветеринарная микробиология – изучает микробов, вызывающих заболевания у домашних животных, разрабатывает методы диагностики, профилактики и лечения данных болезней.
• *Техническая (промышленная) микробиология – изучает микроорганизмы, которые можно использовать в производственных процессах для получения биологически активных веществ, биомассы и пр. Многие исследования происходят на стыке дисциплин (например, молекулярная биология, генная инженерия, биотехнология).
• *Санитарная микробиология изучает бактерий, обитающих в объектах окружающей среды, как автохтонных, так и аллохтонных, способных вызвать загрязнение окружающей среды и играть определенную роль в эпидемиологии инфекций.
• *Экологическая микробиология изучает роль микроорганизмов в природных экосистемах и пищевых цепях.
• *Популяционная микробиология выясняет природу межклеточных контактов и взаимосвязь клеток в популяции.
• *Космическая микробиология характеризует физиологию земных микроорганизмов в условиях космоса, изучает влияние космоса на симбиотические бактерии человека, занимается вопросами предупреждения занесения космических микроорганизмов на Землю.
• *Медицинская микробиология – изучает микробов, вызывающих заболевания у человека. Изучает патогенез и клиническую картину заболеваний, факторы патогенности. Разрабатывает методы профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней человека.

За время существования микробиологии сформировались общая, техническая, сельскохозяйственная, ветеринарная, медицинская, санитарная ветви.

Общая изучает наиболее общие закономерности, свойственные каждой группе перечисленных микроорганизмов: структуру, метаболизм, генетику, экологию и т. д.

Техническая занимается разработкой биотехнологии синтеза микроорганизмами биологически активных веществ: белков, нуклеиновых кислот, антибиотиков, спиртов, ферментов, а также редких неорганических соединений.

Сельскохозяйственная исследует роль микроорганизмов в круговороте веществ, использует их для синтеза удобрений, борьбы с вредителями.

Ветеринарная изучает возбудителей заболеваний животных, методы диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения, направленного на уничтожение возбудителя инфекции в организме больного животного.

Медицинская микробиология изучает болезнетворные(патогенные) и условно-патогенные для человека микроорганизмы, а также разрабатывает методы микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения вызываемых ими инфекционных заболеваний.

Санитарная микробиология изучает санитарно-микробиологическое состояние объектов окружающей среды, пищевых продуктов и напитков, и разрабатывает санитарно-микробиологические нормативы и методы индикации патогенных микроорганизмов в различных объектах и продуктах

Основные этапы развития микробиологии.

Выделяют следующие 5 периоды: эвристический, морфологический, физиологический, иммунологический, молекулярно-генетический

1. Эвристический: IV-III тыс. до н.э. – эмпирические знания. Гиппократ : предполагал о природе заразности заболеваний. Факасторо : идея о живом контагии, вызывающем болезни; рекомендовал изолировать больных и надевать маски
2. Морфологический: Открытие в 1676г. ^ Антонием ван Левенгуком ; изготовление линз, увеличивающих в 200-300 раз. Описал и зарисовал многие микроорганизмы, обнаруженные в различных настоях, в колодезной воде, на мясе и др. объектах. Назвал микробы «анималькулюсами».
3. Физиологический: Луи Пастер (1822-1895) французский ученый-химик; основоположник микробиологии, иммунологии, биотехнологии но и характером жизнедеятельности; они вызывают разнообразные химические превращения в субстратах, на которых развиваются; он изучал различные виды брожения (спиртовое, маслянокислое), доказал существование анаэробных организмов
   Значительным вкладом в микробиологию явились исследования немецкого ученого Роберта Коха (1843-1910).

   Им были введены в практику плотные питательные среды для выращивания микробов; это позволило разработать методы выделения (изолирования) микробов в «чистые культуры», т. е. культуры каждого вида в отдельности, развывшееся в одной клетке. Ввел окраску анилиновыми красителями. Микрофотографии. Изучал возбудителей сибирской язвы, туберкулеза, холеры и др. заразных болезней; Сформулировал триаду Коха-Генле: найди, докажи, уничтожь. В 1905 – нобелевская премия.

4. Иммунологический: Многочисленные открытия в области микробиологии во второй половине XIX в.

   Приведите классификацию бактерий по их форме

   способствовали началу бурного развития иммунологии.
   ^ И. И. Мечников (1845-1916) разработал фагоцитарную теорию иммунитета — невосприимчивости организма к заразным болезням. Ему принадлежит идея использования антагонистических отношений между микробами, что легло в основу современного учения об антибиотиках; с ним связано развитие микробиологии в России; он организовал первую в России бактериологическую лабораторию (в Одессе). В 1903 – нобелевская премия. Пауль Эрлих : немецкий химик. Разработал теорию гуморальной защиты организма антителами. Получил Нобелевскую премию в 1908г.

5. Молекулярно-генетический: Стенли Прузинер : американский биолог. Открыл прионы-эндогенные клеточные образование, связанные с ошибками биосинтеза белка, которые обусловлены мутацией генов, ошибвами трансляции, процессами протеолиза Н. Ф. Гамалея (1859 — 1949) изучал вопросы медицинской микробиологии; открыл станцию по прививкам против бешенства; описал явление бактериофагов

3. Классификация микроорганизмов. Различия между эукариотами, прокариотами и вирусами.

Микробы, или микроорганизмы (бактерии, грибы, простейшие, вирусы), систематизиро­ваны по их сходству, различиям и взаимо­отношениям между собой. Этим занимается специальная наука - систематика микроор­ганизмов. Систематика включает три части: классификацию, таксономию и идентифика­цию. В основу таксономии микроорганизмов поло­жены их морфологические, физиологические, биохимические и молекулярно-биологические свойства. Различают следующие таксономи­ческие категории: царство, подцарство, отдел, класс, порядок, семейство, род, вид, подвид и др. В рамках той или иной таксономичес­кой категории выделяют таксоны - группы организмов, объединенные по определенным однородным свойствам.

Микроорганизмы представлены доклеточными формами (вирусы - царство Vira) и клеточными формами (бактерии, архебактерии, грибы и простейшие). Различают 3 доме­на (или «империи»): «Bacteria», «Archaea» и «Eukarya»:

домен «Bacteria» - прокариоты, пред­ставленные настоящими бактериями (эубактериями);

домен «Archaea» - прокариоты, пред­ставленные архебактериями;

домен «Eukarya» - эукариоты, клетки которых имеют ядро с ядерной оболочкой и ядрышком, а цитоплазма состоит из высоко­организованных органелл - митохондрий, аппарата Гольджи и др. Домен «Eukarya» вклю­чает: царство Fungi (грибы); царство животных Animalia (включает прстейшие – подцарство Protozoa); царство растений Plante. Домены включают царства, типы, классы, порядки, семейства, роды, виды.

Вид . Одной из ос­новных таксономических категорий является вид (species ). Вид - это совокупность особей, объединенных по близким свойствам, но от­личающихся от других представителей рода.

Чистая культура . Совокупность однородных микроорганиз­мов, выделенных на питательной среде, характеризующихся сходными морфологичес­кими, тинкториальными (отношение к кра­сителям), культуральными, биохимическими и антигенными свойствами, называется чис­той культурой.

Штамм . Чистая культура микроорганизмов, выделен­ных из определенного источника и отличаю­щихся от других представителей вида, называ­ется штаммом. Штамм - более узкое понятие, чем вид или подвид.

Клон . Близким к понятию штам­ма является понятие клона. Клон представляет собой совокупность потомков, выращенных из единственной микробной клетки.

Для обозначения некоторых совокупностей микроорганизмов, отличающихся по тем или иным свойствам, употребляется суффикс var (разновидность) вместо ранее применявшегося type .

4. Классификация бактерий. Принципы современной систематики и номенклатуры, основные таксономические единицы. Понятие о виде, варианте, культуре, популяции, штамме.

Наибольшую известность получила фенотипическая классификация бактерий, основанная на строении их клеточной стенки.

Крупнейшими таксономическими группами в ней стали 4 отдела: Gracilicutes (грамотрицательные), Firmicutes (грамположительные ), Tenericutes (микоплазмы ; отдел с единственным классом Mollicutes ) и Mendosicutes (археи ) Mollicutes -Микоплазмы - прокариотные одноклеточные , грамотрицательные микроорганизмы , не имеющие клеточной стенки , которые были открыты при изученииплевропневмонии у коров .

Микоплазмы, по всей видимости, являются наиболее простыми самостоятельно воспроизводящимися живыми организмами, объём их генетической информации в 4 раза меньше, чем у Escherichia coli .

Многочисленные микроорганизмы (бактерии, грибы, простейшие, вирусы) строго систематизированы в определенном порядке по их сходству, различиям и взаимоотношениям между собой. Этим занимается специальная наука, называемая систематикой микроорганизмов.

Раздел систематики, изучающий принципы классификации, называется таксономией (от греч.

taxis . расположение, порядок). Таксон. группа организмов, объединенная по определенным однородным свойствам в рамках той или иной таксономической категории. Самой крупной таксономической категорией является царство, более мелкими. подцарство, отдел, класс, порядок, семейство, род, вид, подвид и др. Образование названий микроорганизмов регламентируется Международным кодексом номенклатуры (зоологической, ботанической, номенклатуры бактерий, вирусов). В основу таксономии микроорганизмов положены их морфологические, изиологические, биохимические, молекулярно-биологические свойства.

Согласно современной систематике, патогенные (болезнетворные) бактерии относятся к надцарству прокариотов (Procaryotae), царству эукариот (Eucaryotae), грибы - к царству микота (Mycota), простейшие - к царству Protozoa, вирусы - к царству Vira.

Вид - совокупность микроорганизмов, имеющих общий корень происхождения и максимально близкие фенотипические признаки и свойства. (Вид - эволюционно сложившаяся совокупность особей, имеющих единый тип организации, который в стандартных условиях проявляется сходными фенотипическими признаками: морфологическими, физиологическими, биохимическими и др.)

Популяция - совокупность особей одного вида, обитающих в пределах биотопа (территориально ограниченный участок биосферы с относительно однородными условиями жизни).

Штамм - чистые культуры микробов одного вида, полученные из разных источников или из одного источника в разное время.

Чистая культура - популяция состоящая из особей одного вида. (из одной микробной клетки на искусственной питательной среде).

5. Методы микроскопии. Микроскопический метод диагностики инфекционных заболеваний.

Люминесцентная (или флюоресцентная) микроскопия. Осно­вана на явлении фотолюминесценции.

Люминесценция - свечение веществ, возникающее после воз­действия на них каких-либо источников энергии: световых, элек­тронных лучей, ионизирующего излучения. Фотолюминесцен­ция - люминесценция объекта под влиянием света. Если осве­щать люминесцирующий объект синим светом, то он испускает лучи красного, оранжевого, желтого или зеленого цвета. В ре­зультате возникает цветное изображение объекта.

Темнопольная микроскопия. Микроскопия в темном поле зре­ния основана на явлении дифракции света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частиц (эффект Тиндаля). Эффект достигается с помощью параболоид- или кардиоидконденсора, которые заменяют обычный конденсор в био­логическом микроскопе.

Фазово-контрастная микроскопия. Фазово-контрастное приспособление дает возможность увидеть в микроскоп прозрачные объекты. Они приобретают высокую контрастность изображения, которая может быть позитивной или негативной. Позитивным фазовым контрастом называют темное изображение объекта в светлом поле зрения, негативным - светлое изображение объек­та на темном фоне.

Для фазово-контрастной микроскопии используют обычный микроскоп и дополнительное фазово-контрастное устройство, а также специальные осветители.

Электронная микроскопия. Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способно­сти светового микроскопа (0,2 мкм). Электронный микроскоп применяется для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов, макромолекулярных структур и других субмик­роскопических объектов.

В повседневной практике бактериологической лаборатории микроскопическое исследование, как правило, используют для ускоренной ориентировочной диагностики.

Основные задачи микроскопии: выявление возбудителя в клиническом материале, ориентировочная идентификация на основе определения характерных морфологических и тинкториальных признаков микроорганизмов, а также изучение окрашенных мазков из колоний чистых культур. При некоторых инфекционных болезнях, для возбудителей которых характерна специфичность морфологии (протозойные болезни, гельминтозы, грибковые заболевания, спирохетозы), микроскопическое исследование - основной или один из основных методов диагностики.

Материалом для микроскопического исследования могут служить кровь, костный мозг, СМЖ, пунктаты лимфатических узлов, фекалии, дуоденальное содержимое и жёлчь, моча, мокрота, отделяемое мочеполовых путей, биоптаты тканей, мазки со слизистых оболочек (ротовой полости, нёбных миндалин, носа, влагалища и др.).

6. Методы окраски микробов и их отдельных структур.

Методы окраски. Окраску мазка производят простыми или сложными методами. Простые заключаются в окраске препарата одним красителем; сложные методы (по Граму, Цилю - Нильсену и др.) включают последовательное использование нескольких красителей и имеют дифференциально-диагностическое значение. Отношение микроорганизмов к красителям расценивают как тинкториальные свойства. Существуют специальные методы окраски, которые используют для выявления жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида и разных цитоплазматических включений.

При простых методах мазок окрашивают каким-либо одним красителем, используя красители анилинового ряда (основные или кислые). Если красящий ион (хромофор) - катион, то краситель обладает основными свойствами, если хромофор — анион, то краситель имеет кислые свойства. Кислые красители - эритрозин, кислый фуксин, эозин. Основные красители - генциановый фиолетовый, кристаллический фиолетовый, метиленовый синий, основной фуксин. Преимущественно для окраски микроорганизмов используют основные красители, которые более интенсивно связываются кислыми компонентами клетки. Из сухих красителей, продающихся в виде порошков, готовят насыщенные спиртовые растворы, а из них - водно-спиртовые, которые и служат для окрашивания микробных клеток. Микроорганизмы окрашивают, наливая краситель на поверхность мазка на определенное время. Окраску основным фуксином ведут в течение 2 мин, метиленовым синим - 5-7 мин. Затем мазок промывают водой до тех пор, пока стекающие струи воды не станут бесцветными, высушивают осторожным промоканием фильтровальной бумагой и микроскопируют в иммерсионной системе. Если мазок правильно окрашен и промыт, то поле зрения совершенно прозрачно, а клетки интенсивно окрашены.

Сложные методы окраски применяют для изучения структуры клетки и дифференциации микроорганизмов. Окрашенные мазки микроскопируют в иммерсионной системе. Последовательно нанести на препарат определенные красители, различающиеся по химическому составу и цвету, протравы, спирты, кислоту и др.

1 2 3 4 5 6 7 8 9

Микробиология – наука, изучающая строение, свойства и жизнедеятельность микроорганизмов. Пища является благоприятной питательной средой для развития микробов, которые своим действием могут изменить свойства и качество пищи, делая её опасной для здоровья человека.

Микробы – одноклеточные организмы – широко распространены в почве, воде, воздухе.

Одни микробы играют положительную, а другие отрицательную роль.

Морфология микробов (бактерии, плесневелые грибы, дрожжи, вирусы)

Название микробов	Форма	Способ размножения
Бактерии – одноклеточные микроорганизмы размером 0,4 – 10 мкм.	Делят на: 1) кокки – шаровидной формы (микрококки, диплококки, тетракокки) 2) палочки (одиночные, двойные, цепочки) 3. вибрионы изогнутые и 4. спириллы спирально извитые 5. спирохеты формы	Путем простого деления в течении 20-30 минут.
Плесневелые грибы – одноклеточные или многоклеточные растительные организмы, нуждающиеся в пищевых продуктах и в доступе воздуха.	Имеют форму вытянутых переплетающихся нитей толщиной 1-15 мкм.	С помощью гиф и спорами.
Дрожжи – одноклеточные неподвижные микроорганизмы.	Бывают разной формы: круглые, овальные, палочковидные	В благоприятных условиях в течении нескольких часов следующими способами: почкованием, спорами и делением.
Вирусы – частицы, не имеющие клеточного строения, обладающие своеобразным обменом веществ, способностью к размножению.	Бывают круглой, прямоугольной и нитевидной формы размером от 8 до 150 нм.

Физиология микробов

Микробы, как и все живые существа, состоят из белков (6-14 %), жиров (1-4 %), углеводов, минеральных веществ, воды (70-85 %), ферментов.

Вода составляет основную массу клетки микроорганизма. Количе-ство ее колеблется от 70 до 85 % - в вегетивных клетках и около 50 % в спорах. В воде растворены все важные органические и минеральные вещества микробной клетки и протекают основные биохимичес-кие процессы (гидролиз белков, углеводов и др.).

Белки - основа жизненных структур микроорганизмов. Они вхо-дят в состав цитоплазмы, ядра, оболочек и другие структуры клетки. 1>елки микробов состоят из аминокислот.

Углеводы - входят в состав оболочки, слизистых капсул, прото-плазмы и в виде зерен гликогена - запасного питательного вещества. Углеводы поступают в клетку микробов из окружающей среды и используются клеткой как источник энергии.

Классификация и физиология микроорганизмов

В клетках имеются как простые углеводы, так и сложные (крахмал, гликоген, клетчатка).

Жиры - в небольшом количестве входят в состав цитоплазмы, ядра в виде сложных соединений с белками. Жиры служат источни-ком энергии микроорганизмов.

Минеральные вещества играют важную роль в построении слож-ных белков, витаминов, ферментов микробной клетки. Растворимые минеральные вещества поддерживают нормальный уровень внутри-клеточного осмотического давления (тургор).

Минеральные вещества микробов представлены в виде: фосфора, натрия, магния, железа, серы и др.

Ферменты - вещества ускоряющие (катализаторы) биохимичес-кие процессы и находятся внутри клетки микробов. Микробы содер-жат различные ферменты, одни из которых влияют на биохимичес-кие процессы внутри клетки, другие выделяются наружу, перераба-тывая вещества окружающей среды, вызывая брожение, гниение и другие процессы в пищевых продуктах.

Питание микробов. Микробы питаются белками, жирами углеводами, минеральными веществами, которые проникают в клетку в растворенном виде через оболочку путем осмоса(процесс диффу-зии через полупроницаемую оболочку). Белки и сложные углеводы усваиваются микробами только после расщепления их на простые составные части ферментами, выделенными микроорганизмами.

Для осуществления нормального питания микробов необходимо определенное соотношение концентрации веществ как внутри клет-ки микроорганизма, так и в окружающей среде. Наиболее благопри-ятная концентрация - содержание 0,5 % хлористого натрия в окружающей среде. В среде, где концентрация растворимых веществ на много выше (2-10 %), чем в клетке, вода из клетки переходит в окружающую среду, происходит обезвоживание и сморщивание цитоплазмы, что приводит к гибели микроба. Это свойство микроорганизмов используют при консервировании продуктов сахаром (варенье) или солью (посол мяса, рыбы).

Дыхание микробов. Дыхание микробам необходимо для по-лучения энергии, обеспечивающей все жизненные процессы. По спо-собу дыхания микробы делят на аэробы, нуждающиеся в кислороде воздуха (плесневые грибы, уксуснокислые бактерии); анаэробы, жи-вущие и развивающиеся при отсутствии кислорода (ботулинус, маслянокислые бактерии), условные (факультативные) анаэробы, развивающиеся как в присутствии кислорода, так и без него (молочно-кислые бактерии, дрожжи).

Биология дрожжей

5. Морфология дрожжей

Макроморфологические признаки очень изменчивы и сильно зависят от состава среды и условий культивирования, поэтому они имеют весьма ограниченное значение в систематике дрожжей. . Дрожжевые культуры, растущие на плотных средах…

Вегетативное размножение кустарников

1.2 Способы размножения кустарников

Кустарники размножаются черенками, семенами, отводками. Семенное размножение большинства хвойных зачастую затруднено ввиду низкой доброкачественности и длительной всхожести семян, а также медленного роста сеянцев…

Вегетативное размножение хвойных растений

1.2 Способы размножения хвойных растений

Семенное размножение большинства хвойных зачастую затруднено ввиду низкой доброкачественности и длительной всхожести семян, а также медленного роста сеянцев…

Генетически модифицированные организмы. Принципы получения, применение

1.2.1 Способы получения ГМ микроорганизмов

Способность организмов синтезировать те или иные биомолекулы, в первую очередь белки, закодирована в их геноме. Поэтому достаточно «добавить» нужный ген, взятый из другого организма, в бактерию…

Микробиология

2. Энергетический обмен микробов. Способы получения энергии — брожение, дыхание. Типы дыхания бактерий

Жизненные функции микроорганизмов: питание, дыхание, рост и размножение — изучает физиология. В основе физиологических функций лежит непрерывный обмен веществ (метаболизм). Сущность обмена веществ составляют два противоположных…

Микробиология питьевой воды

1.1 Закономерности количественного и качественного содержания микроорганизмов в пресных водоемах от различных факторов

Микрофлора различных водоемов содержит достаточное количество питательных веществ, что является главным фактором, способствующим развитию микроорганизмов. Чем богаче он, органическими веществами…

Морфология внутреннего строения рыб

2.8 Половая система и способы размножения

Способы размножения рыб различны. Некоторые живородящие — из тела матери выходит активная молодь. Остальные — яйцекладущие, т.е. мечут икру, оплодотворяемую во внешней среде. Репродуктивное поведение некоторых рыб весьма своеобразно…

Морфология и классификация прокариотов и эукариотов. Генетика микроорганизмов

4. Морфология и классификация эукариотов (микроскопических грибов и дрожжей)

Эукариоты (мицелиальные и дрожжевые грибы). Грибы. Общая характеристика. Грибы (Мусоtа) — обширная и разнообразная группа растительных организмов. Они не содержат хлорофилла…

1.

Перенос генетического материала у актиномицетов

Перенос генетического материала и генетическое картирование у актиномицетов

2. Генетическое картирование актиномицетов

Генетика актиномицетов исследована достаточно хорошо. Для наиболее изученных видов еще с конца 50-х гг. составлялись на основании конъюгационных скрещиваний подробные генетические карты с множеством нанесенных на них маркеров…

Плесневые грибы

1. Способы размножения плесневых грибов.

2.2. Классификация и морфология бактерий

Способы образования и размножения спор. Значение бесполого спорообразования для идентификации рода грибов

Размножение происходит путем деления, идущего в поперечном направлении. При делении бактерия распадается на две равные или неравные по величине части. Образовавшиеся две клетки рассматриваются как материнская и дочерняя…

Размножение — одно из фундаментальных свойств живого. Способы и формы размножения организмов

Раздел 2. Основные способы и формы размножения

Процесс размножения исключительно сложен и связан не только с передачей генетической информации от родителей к потомству, но и с анатомическими и физиологическими свойствами организмов, с их поведением, гормональным контролем…

Роль микроорганизмов в круговороте химических элементов в природе

6. Роль микроорганизмов в круговороте фосфора. Различные типы жизни бактерий, основанные на использовании соединений фосфора

Круговорот фосфора несколько отличается от круговорота остальных элементов. Освобождение фосфора из органических соединений происходит в результате процессов гниения. Однако, до сих пор не обнаружены микроорганизмы…

Способы размножения у различных микроорганизмов, сущность и химизм их дыхания

2. Характеристика аэробных и анаэробных микроорганизмов. Сущность и химизм дыхания у микроорганизмов

Потребность в энергии обеспечивается процессами энергетического обмена, сущность которых заключается в окислении органических веществ, сопровождаемом выделением энергии…

Углеводородокисляющие микроорганизмы – перспективные объекты экологической биотехнологии

1.3 Трансформации, осуществляемые спорами грибов и актиномицетов

Трансформации, осуществляемые спорами, заслуживают специального внимания. Они обладают рядом удобств как технологические процессы. Неожиданно высокая энзиматическая активность, которую демонстрируют споры…

БАКТЕРИИ (греческий bakterion палочка) - разнообразная по биол, свойствам группа широко распространенных на Земле микроскопических, в основном одноклеточных, организмов, принадлежащих к низшим формам жизни.

Первые сведения о бактериях были получены в 17 веке из исследований Левенгука, обнаружившего их основные формы. Бактерии могут существовать в самых разнообразных условиях.

Большинство их лишено хлорофилла. Исключение составляют анаэробные пурпурные и зеленые серобактерии, а также несерные пурпурные бактерии, содержащие хлорофилл и использующие солнечную энергию для фотосинтеза. Бактерии могут усваивать неорганический углерод и азот, использовать в качестве источников энергии многие неорганические и органические соединения, осуществлять превращения углерода, азота, серы, железа и других элементов.

Наряду с водорослями бактерии являются одними из самых древних организмов на Земле. Клеточное строение бактерий сходно с сине-зелеными водорослями, актиномицетами (см.) и спирохетами (см.), с которыми, как полагают, бактерии связаны филогенетически. Среди бактерий имеются виды, вызывающие заболевания у человека, животных и высших растений.

Систематика

Первые попытки классифицировать бактерии по морфологическим признакам были предприняты в 18 веке. Позднее в основу классификации были положены физиологические признаки. В качестве таксономических признаков применялись наиболее стабильные - форма, окраска по Tpainy (см. Грама метод), спорообразование, тип дыхания, биохимические, антигенные и другие свойства, однако до наст, времени не создано классификации, построенной на принципе филогенетического родства бактерий с учетом эволюционных связей.

Широкое распространение получила классификация Берджи (D. Bergey, 1957), в основу которой положены международные правила номенклатуры бактерий. Номенклатура выдержана в биноминальной системе, принятой в зоологических и ботанических классификациях (см. табл. 1). В качестве таксономических признаков взяты различные биологические свойства бактерий.

Таблица 1

КЛАССИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ (по Берджи)

Класс Schizomycetes
	семейство
Патогенные бактерии
Pseudomonadales (неподвижные клетки с полярными жгутиками)
Eubacteriales (кокковидные, палочковидные бактерии с перитрихиальными жгутиками и неподвижные формы)
	Lactobacil laceae
		Peptostreptococcus
	Enterobacteriaceae
	Corynebacteriaceae
Actinomycetales (нитевидные, ветвящиеся клетки - актиномицеты)	Mycobacteriaceae
	Actinomycetaceae
	Streptomycetaceae
Spirochaetales (подвижные, неригидные бактерии, у которых цитоплазма спирально закручена вокруг осевой нити)
Mycoplasmatales (мелкие полиморфные, фильтрующиеся формы)	Mycoplasmataceae
	Acholeplasmataceae
Непатогенные бактерии
Chlamydobacteriales
Hyphomicrobiales

Приведенные в таблице 1 микоплазмы - мельчайшие образования, отграниченные вместо ригидной клеточной стенки только цитоплазматической мембраной, существенно отличающиеся от бактерий, выделены в настоящее время в отдельный класс - Mollicutes (см. Mycoplasmataceae).

Морфология

Существует три основные формы бактерий - шаровидная, палочковидная и спиралевидная (рис. 1); большая группа нитчатых бактерий объединяет преимущественно водные бактерии и не содержит патогенных видов.

Шаровидные Ббактерии - кокки , подразделяются в зависимости от расположения клеток после деления на несколько групп: 1) диплококки (делятся в одной плоскости и располагаются парами); 2) стрептококки (делятся в одной плоскости, но при делении не отделяются друг от друга и образуют цепочки); 3) тетракокки (делятся в двух взаимно перпендикулярных плоскостях, образуя группы по четыре особи); 4) сарцины (делятся в трех взаимно перпендикулярных плоскостях, образуя группы кубической формы); 5) стафилококки (делятся в нескольких плоскостях без определенной системы, образуя скопления, напоминающие виноградные грозди). Средний размер кокков 0,5-1 мкм (см. Кокки).

Палочковидные бактерии имеют строго цилиндрическую или овоидную форму, концы палочек могут быть ровными, закругленными, заостренными. Палочки могут располагаться попарно в виде цепочек, но большинство видов располагается без определенной системы. Длина палочек варьирует от 1 до 8 мкм, средний диаметр 0,5-2 мкм. Принято собственно бактериями называть палочки, не образующие спор (см. Споры). Бактерии, образующие споры, называются бациллами. По принятой номенклатуре к бациллам относят аэробные формы. Анаэробных спорообразующих бактерий относят к клостридиям. Спорообразование у бацилл и клостридий не связано с процессом размножения. Споры у них относятся к типу эндоспор, представляющих собой круглые или овальные тела, преломляющие свет и окрашивающиеся по специальным методам (цветн. рис. 1 и 2). Расположение спор в клетке, их величина и форма характерны для каждого вида бактерий (рис. 2). Некоторые палочки (микобактерии, коринебактерии) образуют нитевидные особи, другие (клубеньковые бактерии) образуют разветвленные, звездчатые формы - так называемые бактероиды (рис. 3).

Спиралевидные формы бактерий подразделяют на вибрионы и спириллы. Изогнутость тел вибрионов не превышает одной четверти оборота спирали. Спириллы образуют изгибы из одного или нескольких оборотов (см. Вибрионы , Спириллы).

Некоторые бактерии обладают подвижностью, что отчетливо видно при наблюдении методом висячей капли (см.) или другими методами. Подвижные бактерии активно передвигаются с помощью особых органелл - жгутиков (см. Жгутики бактериальные) либо за счет скользящих движений (миксобактерии).

Капсула имеется у ряда бактерий и является их внешним структурным компонентом (рис. 4 и цветн. рис. 3). У ряда бактерий аналогично капсуле имеется образование в виде тонкого слизистого слоя на поверхности клетки. У некоторых бактерий капсула формируется в зависимости от условий их существования. Одни бактерии образуют капсулы только в макроорганизме, другие - как в организме, так и вне его, в частности на питательных средах, содержащих повышенные концентрации углеводов. Некоторые бактерии образуют капсулы независимо от условий существования (см. Капсульные бактерии). В состав капсулы большинства бактерий входят полимеризованные полисахариды, состоящие из пентоз и аминосахаров, уроновые кислоты, полипептиды и белки. Капсула не является аморфным образованием, а определенным образом структурирована. У некоторых бактерий, например, пневмококков, капсула определяет их вирулентность, а также некоторые антигенные свойства бактериальной клетки.

Клеточная стенка бактерий определяет их форму и обеспечивает сохранение внутреннего содержимого клетки. По особенностям химического состава и структуры клеточной стенки бактерии дифференцируют с помощью окрашивания по Граму.

Строение клеточной стенки различно у грамположительных и грамотрицательных бактерий. Основным слоем клеточной стенки, характерным для всех видов бактерий, является ригидный слой (синоним: мукопептидный слой, муреин, пептидогликан; последнее название наиболее соответствует химическому строению слоя), в состав которого вводят повторяющиеся остатки аминосахаров - N-ацетилглюкозамина и N-ацетилмурамовой кислоты, образующих основу линейного полимера - муреина.

С остатком N-ацетилмурамовой кислоты соединен полипептид, состоящий у большинства бактерий из четырех аминокислотных остатков - L-алани-на, D-глутаминовой кислоты, L-лизина или диаминопимелиновой кислоты (ДАП) и D-аланина в молярном отношении 1: 1: 1: 1. В составе пептида в зависимости от вида бактерий могут наблюдаться вариации. Лизин или ДАП могут быть заменены орнитином, 2,6-диаминобутаровой кислотой и др. Иногда к остатку глутаминовой кислоты присоединена добавочная аминокислота. Пептидные цепи соединены друг с другом с помощью перекрестных полипептидных цепочек, состав которых широко варьирует у разных видов бактерий. Перекрестные связи, например, у стафилококка, образованы пентаглициновыми мостиками, соединяющими D-аланин одной пептидной единицы с лизином другой. У некоторых бактерий перекрестные связи идентичны пептидным единицам. У E. coli пептидные цепи соединены непосредственно друг с другом через D-аланин одной цепи и ДАП другой. Схематическое изображение пептидогликана представлено на рис. 5.

У грамположительных бактериях в дополнение к пептидогликану имеются тейхоевые кислоты (рибит-тейхоевые и глицерин-тейхоевые), также образующие полимер и ковалентно связанные с пептидогликаном. У некоторых бактериях обнаружены тейхуроновые и 2-аминоманнуровая кислоты.

В состав клеточных стенок грамотрицательных бактерий, кроме ригидного слоя, входят липопротеиновый и липополисахаридный слои. Липополисахаридный слой (Л ПС) наиболее изучен у энтеробактерий, и особенно сальмонелл. Л ПС представляет собой комплекс фосфорилирование гетерополисахаридов, ковалентно связанных с содержащим глюкозамин липидом (липид А). В состав Л ПС входит О-антиген клетки (у энтеробактерий). Полисахаридная часть Л ПС состоит из основной (базисной) структуры и О-антигенной части. В состав базисной части, присущей всем энтеробактериям, входят гептоза, 2-кето-З-дезоксиоктонат (КДО), глюкоза, галактоза и N-ацетил-глюкозамин. Через КДО базисная часть присоединена к компоненту, состоящему из липида А, этанол амина, фосфата и КДО. С другой стороны (наружной) к базисной структуре присоединены боковые цепи, образованные повторяющимися олигосахаридными единицами. Наружные полисахаридные цепи видоспецифичны и являются соматическими О-антигенами. О-специфичность определяется углеводным составом всей боковой цепи, последовательностью расположения в ней углеводов и концевым сахаром, 6-дезокси- или 3,6-дидезоксигексозой. Наследственные нарушения в биосинтезе ЛПС энтеробактерий базисной части или O-боковых цепей приводят к появлению R-форм мутантов (см. Диссоциация бактерий).

Рис. 6. Строение клетки энтеробактерии (схематическое изображение): 1- детерминантные группы О-антигена; 2 - липопротеиновый слой; 3 - жгутик (Н-антиген); 4 - цитоплазматическая мембрана; 5 и б - рибосомы в цитоплазме; 7 - нуклеоид; 8-капсула; 9 - липополисахаридный слой; 10 - ригидный слой клеточной стенки.

Липопротеиновый слой (ЛП) у грамотрицательных бактерий, по представлению Вейделя (Weidel), является наружным слоем клеточной стенки. ЛПС занимает промежуточное положение, наиболее глубоко расположенным является ригидный слой. Эта схема не объясняет обнаружение О-антигена без предварительного разрушения Л П. Поэтому были предложены другие схемы строения стенки, согласно которым ЛП покрывает бактериальную клетку не сплошным слоем, а через него проходит ЛПС в виде «отростков», как это показано на рис. 6. Это представление подтверждено иммунохимическими методами с использованием ферритина при изучении локализации О-антигена.

У некоторых грамположительных бактериях клеточная стенка, так же как и у грамотрицательных, состоит не только из ригидного слоя, но имеет многослойное строение. Например, у стрептококков в ее состав входит белковый слой, промежуточный липополисахаридный и внутренний ригидный слой. Клеточная стенка не является инертной структурой в ферментативном отношении. В ее составе обнаружены аутолитические ферменты, фосфатаза, аденозинтрифосфатаза.

Цитоплазматическая мембрана бактерий прилегает к внутренней поверхности клеточной стенки, отделяет ее от цитоплазмы и является очень важным в функциональном отношении компонентом клетки. В мембране локализованы окислительно-восстановительные ферменты, с системой мембран связаны такие важнейшие функции клетки, как деление, биосинтез ряда компонентов, хемо- и фотосинтез и др. Толщина мембраны у большинства бактерий составляет 7-10 нм. Электронномикроскопическим методом обнаружено, что она состоит из трех слоев: двух электронно-плотных и промежуточного - электронно-прозрачного. В состав мембраны входят белки, фосфолипиды, липопротеины, небольшое количество углеводов и некоторых других соединений. Многие белки мембраны Б. являются ферментами, участвующими в процессах дыхания, а также в биосинтезе компонентов клеточной стенки и капсулы. В составе мембраны определяются также пермеазы, обеспечивающие перенос в клетку растворимых веществ. Мембрана служит осмотическим барьером, она обладает избирательной полупроницаемостью и ответственна за поступление внутрь клетки питательных веществ и выход из нее продуктов обмена.

Помимо цитоплазматической мембраны, в клетке бактерии имеется система внутренних мембран , получивших название мезосом, которые, вероятно, являются производными цитоплазматической мембраны; их строение варьирует у разных видов бактерий. Наиболее развиты мезосомы у грамположительных бактериях. Строение мезосом неоднотипно, их полиморфизм отмечается даже у одного и того же вида бактерий. Внутренние мембранные структуры могут быть представлены простыми инвагинациями цитоплазматической мембраны, образованиями в виде пузырьков или петель (чаще у грамотрицательных бактерий), в виде вакуолярных, ламмелярных, тубулярных образований. Мезосомы чаще всего локализованы у клеточной перегородки (рис. 7), отмечается также их связь с нуклеоидом. Поскольку в мезосомах обнаружены ферменты дыхания и окислительного фосфорилирования, многие авторы считают их аналогами митохондрий клеток высших. Предполагается, что мезосомы принимают участие в делении клетки, распределении дочерних хромосом в разделяющиеся клетки и спорообразовании. С мембранным аппаратом клетки связаны также функции фиксации азота, хемо- и фотосинтеза. Следовательно, можно полагать, что мембраны клетки играют определенного рода координирующую роль в пространственной организации ряда ферментных систем и органелл клетки.

Рис. 4 . Зерна волютина у коринебактерий

Цитоплазма и включения . Внутреннее содержимое клетки состоит из цитоплазмы (см.), представляющей собой сложную смесь различных органических соединений, находящихся в коллоидном состоянии. На ультратонких срезах цитоплазмы (рис. 7) обнаружено большое количество зерен, значительная часть которых является рибосомами. В цитоплазме бактерий могут содержаться внутриклеточные включения (цветн. рис. 4-6) в виде гранул гликогена, крахмала, жировых веществ. У ряда бактерий в цитоплазме находятся гранулы волютина, состоящие из неорганических полифосфатов, метафосфатов и соединений, близких к нуклеиновым кислотам. Роль волютина до конца не ясна. Некоторые авторы на основании его исчезновения при голодании клеток рассматривают волютин как запасные питательные вещества. Волютин обладает сродством к основным красителям, проявляет хромофильность и метахромазию, легко выявляется в клетках в виде крупных гранул, особенно при специальных методах окраски.

Рибосомы бактерии являются местом синтеза белков клетки, в процессе которого образуются структуры, состоящие из большого числа рибосом (до 20), называемые полирибосомами или чаще полисомами (рис. 8). В образовании полисом принимает участие м-РНК. По окончании синтеза данного белка полисомы вновь распадаются на одиночные рибосомы, или субъединицы. Рибосомы могут располагаться свободно в цитоплазме, но значительная их часть связана с мембранами клетки. На ультратонких срезах большинства бактерий рибосомы обнаруживаются в цитоплазме в виде гранул диаметром около 20 нм. Рибосомы E. coli, очищенные в присутствии ионов магния, осаждаются при ультрацентрифугировании со скоростью седиментации 70 S. При более низких концентрациях магния они диссоциируют на две субъединицы с константами седиментации 50 S и 30 S. Полагают, что 50 S частица имеет сферическую, а 30 S - уплощенную форму. При повышении концентрации ионов магния 70 S частицы образуют димеры. В свободном состоянии (вне синтеза белка) рибосомы находятся в диссоциированном состоянии в рибосомной фракции клеток. Диссоциацию рибосом на субъединицы стимулирует специальный фактор диссоциации. 50 S и 30 S субъединицы имеют мол. вес 1,8· 106 и 0,85-106 соответственно. Обе частицы состоят из рибосомальной РНК (или р-РНК) и белка. 50 S частица содержит по одной молекуле 23 S и 5 S р-РНК. 30 S частица содержит одну молекулу 16 S р-РНК. Белковый состав рибосом неоднороден. 30 S частицы состоят из двадцати одного, а 50 S из тридцати-тридцати пяти различных белков. Часть белков 30 S частиц рибосом нужна как для сборки рибосом, так и для их функционирования, другая часть важна только в функциональном отношении. Рибосомальная РНК имеет важное значение для правильной сборки и организации рибосом.

Степень агрегации рибосом регулируется ионами магния. В рибосомах найдены полиамины и рибонуклеаза I, участвующая, как полагают, в гидролизе м-РНК.

Рис. 10. Радиоавтография хромосомы бактерии coli. Видна циркулярнозамкнутая структура; слева вверху - схема репликации: X - начальная точка репликации, Y - точка роста; А - отреплецированный участок; Б - неотреплецированный участок; В - репликационная точка.

Ядро. Бактерии обладают дискретной ядерной структурой, в связи со своеобразием строения получившей название нуклеиида (рис. 9). Нуклеоиды Б. содержат основное количество ДНК клетки. Они окрашиваются методом Фейльгена (см. Дезоксирибонуклеиновые кислоты), хорошо видны при окраске по Романовскому - Гимзе (см. Романовского - Гимзы метод), после кислотного гидролиза или в живом состоянии при фазово-контрастной микроскопии, а также на ультратонких срезах в электронном микроскопе (рис. 7 и 9). Нуклеоид определяется в виде компактного одиночного или двойного образования. У растущих культур нуклеоиды часто выглядят в виде раздвоенных образований, что отражает их деление. Митотического деления ядерных структур у бактерий не обнаружено. Форма нуклеоидов и их распределение в клетке весьма изменчивы и зависят от ряда причин, в том числе и от возраста культуры. На электронных микрофотографиях в местах расположения нуклеоидов видны светлые участки меньшей оптической плотности. Ядерная вакуоль не отделена от цитоплазмы ядерной оболочкой. Форма вакуоли не постоянна. Ядерные участки заполнены пучками тонких нитей, образующих сложное переплетение. В составе ядерных структур бактерий не обнаружены гистоны (см.); предполагают, что их роль у бактерий выполняют полиамины. Ядра бактерий не похожи на ядра других организмов. Это послужило основой для выделения бактерий в группу прокариотов, в отличие от эукариотов, обладающих ядром, содержащим хромосомы, оболочку и делящимся путем митоза. Нуклеоид бактерии соединен с мезосомой. Характер связи пока не известен. Хромосома бактерий имеет циркулярно замкнутую структуру. Это было показано методом радиоавтографии у E. coli (рис. 10), предварительно меченных 3Н-тимидином. О структуре ДНК судили по распределению зерен меченого тимидина. Подсчитано, что длина замкнутой в кольцо ДНК клетки составляет 1100-1400 мкм, а молекулярный вес 2,8· 109 [Кернс (J. Cairns), 1963].

Жгутики и ворсинки . На поверхности некоторых бактерий имеются органеллы движения - жгутики (рис. 11). Их можно обнаружить с помощью особых методов окраски, микроскопирования в темном поле или в электронном микроскопе. Жгутики имеют спиралевидную форму, причем шаг спирали специфичен для каждого вида бактерий. На основании количества жгутиков и их расположения на поверхности клетки различают следующие группы подвижных микробов: монотрихи, амфитрихи, лофотрихи и перитрихи. Монотрихи имеют один жгутик, расположенный на одном из полюсов клетки и реже субполярно или латерально. У амфитрихов на каждом полюсе клетки расположено по одному жгутику. Лофотрихи имеют пучок жгутиков на одном или двух полюсах клетки. У перитрихов жгутики распределены без определенного порядка по всему телу клетки.

М. А. Пешков (1966) предлагает несколько другую терминологию. Амфи- и лофотрихи он объединяет термином «мультрихи» и выделяет смешанный тип, имеющий два или более жгутиков разного вида в разных точках прикрепления. Основание жгутиков (блефаропласт) расположено в цитоплазматической мембране. Жгутики почти целиком состоят из белка - флагеллина.

На поверхности некоторых бактерий (энтеробактерии), кроме жгутиков, имеются ворсинки (фимбрии, пили), видимые только под электронным микроскопом (рис. 12). Различают несколько морфологических типов ворсинок. Наиболее полно изучен первый тип (общий) и ворсинки, существующие только при наличии в клетке половых факторов (см. Половой фактор бактерий). Ворсинки общего типа покрывают всю поверхность клетки, состоят из белка; половых ворсинок приходится 1-4 на клетку. И те и другие обладают антигенной активностью (см. Конъюгация у бактерий).

Физиология

По химическому составу бактерии не отличаются от других организмов.

В состав бактерий входят углерод, азот, водород, кислород, фосфор, сера, кальций, калий, магний, натрий, хлор и железо. Их содержание зависит от вида бактерии и условий культивирования. Обязательным химическим компонентом клеток бактерий, как и других организмов, является вода, представляющая собой универсальную дисперсионную среду живой материи. Основная часть воды находится в свободном состоянии; ее содержание различно у разных бактерий и составляет 70-85% влажного веса бактерий. Кроме свободной, имеется ионная фракция воды и вода, связанная с коллоидными веществами. По составу органических компонентов клетки бактерий сходны с клетками других организмов, отличаясь, однако, наличием некоторых соединений. В состав бактерий входят белки, нуклеиновые кислоты, жиры, моно-, ди- и полисахариды, аминосахара и др. У бактерий имеются необычные аминокислоты: диаминопимелиновая (содержащаяся еще у сине-зеленых водорослей и риккетсий); N-метиллизин, входящий в состав флагеллина некоторых бактерий; D-изомеры некоторых аминокислот. Содержание нуклеиновых кислот зависит от условий культивирования, фаз роста, физиологического и функционального состояния клеток. Содержание ДНК в клетке более постоянно, нежели РНК. Нуклеотидный состав ДНК неизменен в процессе развития бактерий, видоспецифичен и используется как один из важнейших таксономических признаков. Бактериальные липиды разнообразны. Среди них встречаются жирные кислоты, фосфолипиды, воски, стероиды. Некоторые бактерии образуют пигменты (цветн. рис. 7-9) с интенсивностью, которая широко варьирует у одного и того же вида и зависит от условий выращивания. Твердые питательные среды более благоприятны для образования пигментов. По химическому строению различают каратиноидные, хиноновые, меланиновые и другие пигменты, которые могут быть красного, оранжевого, желтого, коричневого, черного, синего или зеленого цвета. Чаще пигменты нерастворимы в питательных средах и окрашивают только клетки. Пигменты, растворимые в воде (пиоцианин), диффундируют в среду, окрашивая ее. К пигментам бактерий относится также бактериохлорофилл, придающий фиолетовую или зеленую окраску некоторым фотосинтезирующим бактериям.

Ферменты бактерий делятся на функционирующие только внутри клетки (эндоферменты) и только вне клетки (экзоферменты). Эндоферменты в основном катализируют синтетические процессы, дыхание и т. п. Экзоферменты катализируют главным образом гидролиз высокомолекулярных субстратов до соединения с более низким молекулярным весом, способных проникать внутрь клетки.

В клетке ферменты связаны с соответствующими структурами и органеллами. Например, аутолитические ферменты связаны с клеточной стенкой, окислительно-восстановительные ферменты - с цитоплазматической мембраной, ферменты, связанные с репликацией ДНК,- с мембраной или нуклеоидом.

Активность ферментов зависит от ряда условий, в первую очередь от температуры выращивания бактерий и pH среды. Понижение температуры обратимо снижает, а повышение до определенных пределов (40-42°) повышает активность ферментов. У термофильных и психрофильных бактерий оптимум активности ферментов совпадает с оптимальной температурой роста. Оптимальная температура для мезофильных бактерий, к которым принадлежат патогенные бактерии, примерно равна 37°. Оптимум pH в основном лежит в пределах 4-7. Встречаются вариации оптимума pH. Ферменты бактерий, активность которых не зависит от присутствия субстрата в среде культивирования, называют конститутивными. Ферменты, синтез которых зависит от наличия субстрата в среде, называются индуцируемыми (старое название - адаптивные). Например, образование β-галактозидазы у кишечной палочки начинается только при добавлении в среду лактозы, которая индуцирует синтез этого фермента.

Контроль синтеза ферментов осуществляется путем ингибирования конечным продуктом или путем индукции и репрессии.

Ферментативная активность бактерий используется для их идентификации, чаще всего при этом изучаются сахаролитические и протеолитические свойства. Некоторые ферменты, образуемые патогенными бактериями, являются факторами вирулентности (см.).

Питание . Бактерии используют питательные вещества только в виде относительно небольших молекул, проникающих внутрь клетки. Такой способ питания, характерный для всех организмов растительного происхождения, называют голофитным. Сложные органические вещества (белок, полисахариды, клетчатка и др.) могут служить источником питания и энергии только после их предварительного гидролиза до более простых соединений, растворимых в воде либо в липоидах. Способность различных соединений проникать в цитоплазму клеток зависит от проницаемости цитоплазматической мембраны и химические структуры питательного вещества.

Вещества, которые служат источником питания бактерий, поразительно разнообразны. Важнейшим элементом, необходимым для живых организмов, является углерод. Одни виды бактерий (аутотрофы) могут использовать неорганический углерод из углекислоты и ее солей (см. Аутотрофные организмы), другие (гетеротрофы) - только из органических соединений (см. Гетеротрофные организмы). Подавляющее большинство бактерий относится к гетеротрофам. Для усвоения углерода требуется посторонний источник энергии. Немногочисленные виды бактерий, обладающие фотосинтетическими пигментами, используют энергию солнечного света. Эти бактерии называются фотосинтезирующими. Среди них имеются аутотрофы (зеленые и пурпурные серобактерии) и гетеротрофы (несерные пурпурные бактерии). Их называют также соответственно фотолитотрофами и фотоорганотрофами. Большинство же бактерий использует энергию химических реакций и называется хемосинтезирующими. Хемосинтезирующие аутотрофы называются хемолитотрофами, а гетеротрофы - хемоорганотрофами.

Гетеротрофные бактерии усваивают углерод из органических соединений различной химической природы. Легко усваиваются вещества, содержащие ненасыщенные связи или атомы углерода с частично окисленными валентностями. В связи с этим наиболее доступными источниками углерода являются сахара, многоатомные спирты и др. Некоторые гетеротрофы наряду с усвоением органического углерода могут усваивать и неорганический углерод.

Отношение к источникам азота также различно. Существуют бактерии, усваивающие минеральный и даже атмосферный азот. Другие бактерии неспособны синтезировать белковую молекулу или некоторые аминокислоты из простейших соединений азота. В этой группе имеются формы, использующие азот из отдельных аминокислот, из пептонов, сложных белковых веществ и из минеральных источников азота с добавлением несинтезируемых ими аминокислот. К этой группе принадлежат многие патогенные бактерии.

Дыхание . Часть веществ, проникающих внутрь бактериальной клетки, окисляясь, снабжает ее необходимой энергией. Этот процесс называют биол, окислением или дыханием.

Биологическое окисление сводится в основном к двум процессам: дегидрированию субстрата с последующим переносом электронов к конечному акцептору и накоплению в биологически доступной форме высвобождающейся энергии. Конечным акцептором электронов могут служить кислород, некоторые органические и неорганические соединения. При аэробном дыхании конечным акцептором электронов является кислород. Энергетические процессы, в которых конечным акцептором электронов является не кислород, а другие соединения, называются анаэробным дыханием, причем к собственно анаэробному дыханию некоторые исследователи относят те процессы, когда конечным акцептором электронов являются неорганические соединения (нитраты и сульфаты).

Под брожением понимают такие энергетические процессы, в которых органические соединения выступают одновременно как доноры и как акцепторы электронов.

Среди бактерий имеются строгие аэробы (см.), развивающиеся только в присутствии кислорода, облигатные анаэробы, развивающиеся только в отсутствие кислорода, и факультативные анаэробы (см.), способные к развитию и в аэробных и в анаэробных условиях. Большинство бактерий обладает пространственно организованной системой дыхательных ферментов, получившей название дыхательной цепи или цепи переноса электронов.

Дыхание у бактерий, подобно дыханию других организмов, сопряжено с процессами окислительного фосфорилирования, сопровождается образованием соединений, богатых макроэргическими связями (АТФ). Энергия, накапливающаяся в этих соединениях, используется по мере необходимости.

В качестве источника энергии бактерии могут использовать разнообразные органические соединения (углеводы, азотсодержащие вещества, жиры и жирные кислоты, органические кислоты и др.). Способность получать энергию в результате окисления неорганических соединений присуща лишь небольшой группе бактерий. Неорганические вещества, окисляемые ими, специфичны для каждого вида бактерий. К этим бактериям относятся нитрифицирующие бактерии, серобактерии, железобактерии и др. Среди них имеются и аэробы и анаэробы.

Фотосинтезирующие бактерии превращают энергию видимого света непосредственно в АТФ; этот процесс, осуществляемый в ходе фотосинтеза, называют фотофосфорилированием.

Рост и размножение

Бактериальная клетка начинает делиться после завершения последовательных реакций, связанных с воспроизведением ее компонентов.

Наиболее важным процессом роста клетки является воспроизведение ее наследственного аппарата. Разделению нуклеоида предшествуют процессы репликации ДНК (см. Репликация). Репликация начинается, когда отношение ДНК/белок клетки достигнет определенного уровня. Для инициации репликации требуется синтез специфических белковых продуктов. На реплицирующейся ДНК клетки при изучении ауторадиографическим методом различают две точки: точку начала репликации и точку роста (рис. 10). Репликативная точка продвигается по всей ДНК клетки, имеющей, как отмечалось, циркулярно замкнутую структуру. Время прохождения точки репликации от начала до конца всей циркулярной структуры ДНК, или время синтеза ДНК, постоянно и не зависит от скорости роста клеток. У быстро растущих культур, когда время генерации (время, протекающее между делением клеток) меньше, чем время, необходимое для репликации ДНК (40-47 минут у E. coli B/r), новая инициация начинается до окончания предыдущей. Таким образом, у быстро растущих культур имеется несколько репликационных точек (вилок). Процесс репликации ДНК сопровождается сегрегацией синтезирующихся цепей ДНК во вновь образующиеся дочерние клетки. В разделении нитей ДНК большую роль играют мезосомы клетки.

Рост палочковидных клеток во время цикла генерации сводится к экспоненциальному увеличению их длины. Во время деления рост клетки замедляется и начинается вновь после деления.

Окончание репликации ДНК является моментом, инициирующим деление клетки. Угнетение синтеза ДНК до окончания репликации приводит к нарушению процесса деления: клетка перестает делиться и растет в длину. На примере E. coli показано, что для начала деления требуется наличие термолабильного белка и такое соотношение между отдельными полиаминами в клетке, при котором количество путресцина должно превышать количество спермидина. Имеются данные о значении фосфолипидов и аутолизинов для процесса деления клеток.

У растущей культуры бактерий синтезируется полный набор рибосом. Рибосомальная РНК первоначально синтезируется на ДНК-матрице, затем модифицируется и превращается в зрелые 16 S и 23 S р-РНК. 5 S р-РНК также не является прямым продуктом транскрипции (см.). Предшественники рибосом не содержат полного набора рибосомальных белков. Полный набор появляется только в процессе созревания.

Механизм воспроизведения мезосом, как и мембранного аппарата клетки, еще не ясен. Предполагают, что при росте бактериальной клетки мезосомы постепенно разделяются.

При росте бактериальной клетки клеточная перегородка формируется рядом с мезосомой (рис. 7). Образование перегородки приводит к делению клетки. Вновь образованные дочерние клетки отделяются друг от друга. У некоторых бактерий образование перегородки не приводит к разделению клеток: образуются многокамерные клетки.

Получен ряд мутантов у E. coli, у которых клеточная перегородка образуется либо в необычном месте, либо наряду с перегородкой с обычной локализацией формируется добавочная перегородка близко от полюса клетки. В результате деления таких мутантов образуются как обычные клетки, так и маленькие клетки (мини-клетки) размером 0,3-0,5 мкм. Мини-клетки лишены, как правило, ДНК, так как при делении родительской клетки нуклеоид не попадает в них. В связи с отсутствием ДНК миниклетки используются в генетике бактерий для изучения выражения функции генов у внехромосомных факторов наследственности и других вопросов.

При выращивании в жидких питательных средах скорость роста популяции клеток изменяется во времени. Рост популяции бактерий разделяют на несколько фаз. После посева клеток в свежую питательную среду некоторое время бактерии не размножаются - эту фазу называют начальной стационарной или лаг-фазой. Лаг-фаза переходит в фазу положительного ускорения. В этой фазе начинается деление бактерий. Когда скорость роста клеток всей популяции достигает постоянной величины, начинается логарифмическая фаза размножения. В этот период можно рассчитать время генерации, количество генераций и некоторые другие показатели. Логарифмическая фаза сменяется фазой отрицательного ускорения, затем наступает стационарная фаза. Количество жизнеспособных клеток в данной фазе постоянно (М-концентрация - максимальная концентрация жизнеспособных клеток). Затем следует фаза отмирания популяции. На скорость роста популяции влияют: вид культуры бактерий, возраст посеянной культуры, состав питательной среды, температура выращивания, аэрация и др.

Во время роста популяции клеток в них накапливаются продукты обмена, происходит истощение питательных веществ и другие процессы, ведущие к переходу в стационарную и последующие фазы. При постоянном добавлении питательных веществ и одновременном удалении продуктов обмена можно добиться длительного пребывания клеток популяции в логарифмической фазе. Наиболее часто для этой цели применяют хемостат (см.).

Несмотря на постоянную скорость роста популяции бактерий в логарифмической фазе, отдельные клетки все же находятся в разных стадиях деления. Иногда важно синхронизировать рост всех клеток популяции, то есть получить синхронную культуру. Простыми методами синхронизации является изменение температурных условий или культивирование в условиях недостатка питательных веществ. Вначале культуру помещают в неоптимальные условия, затем сменяют их оптимальными. При этом у всех клеток популяции синхронизируется цикл деления, но синхронное деление клеток происходит обычно не более 3-4 циклов.

Ранее неоднократно выдвигались гипотезы, согласно которым превращение одних форм бактерий в другие в цикле развития идет по замкнутому кругу. Все эти гипотезы объединяются общим термином «циклогения». Теоретические представления о циклогении имеют в настоящее время лишь исторический интерес. Однако фактические данные о процессах диссоциации бактерий (см.) не потеряли своего значения.

Действие внешних факторов

Жизнеспособность бактерий при действии внешних факторов изучают разными методами, напр, путем подсчета выживших клеток. Для этого строят кривые выживаемости, выражающие зависимость числа выживших клеток от времени воздействия.

Бактерии относительно устойчивы к низким температурам. Бактерии более чувствительны к действию высоких температур. Обычно при прогревании бактерий при t° 60-70° происходит гибель вегетативных клеток, споры при этом не погибают. Чувствительность бактерий к высоким температурам используется при стерилизации (см.).

Разные виды бактерий относятся по-разному к высушиванию. Одни бактерии (например, гонококки) очень быстро погибают, другие (микобактерии) весьма устойчивы. Однако соблюдая определенные условия (наличие вакуума, специальных сред), можно получить высушенные лиофилизированные культуры бактерий, длительное время сохраняющие жизнеспособность (см. Лиофилизация).

Бактерии можно разрушить путем механического растирания с различными порошками (стеклянный, кварцевый), а также воздействием ультразвука.

Бактерии чувствительны к ультрафиолетовым лучам; наиболее эффективны лучи с длиной волны около 260 нм, что соответствует максимуму поглощения их нуклеиновыми кислотами. Ультрафиолетовые лучи обладают мутагенным действием. Рентгеновские лучи также обладают летальным и мутагенным действием (см. Мутагены).

Чувствительность к химиотерапевтическим препаратам и антибиотикам зависит от вида бактерий и механизма действия препарата на клетку. Из чувствительных бактерий могут быть получены устойчивые формы в результате мутации или при передаче факторов множественной лекарственной устойчивости микроорганизмов (см.).

Распространение бактерий в природе и их роль в круговороте веществ

Патогенность и вирулентность. Бактерии обитают в почве, воде, организме человека и животных. Разнообразные группы бактерий могут развиваться в условиях, не доступных для других организмов. Качественный и количественный состав бактерий, обитающих во внешней среде, зависит от многих условий: pH среды, температуры, наличия питательных веществ, влажности, аэрации, присутствия других микроорганизмов (см. Антагонизм микробов) и др. Чем больше в среде содержится разнообразных органических соединений, тем большее количество бактерий можно в ней обнаружить. В незагрязненных почвах и водах встречается сравнительно небольшое количество сапрофитных форм бактерий. В почве обитают спорообразующие и неспорообразующие бактерии, микобактерии, миксобактерии, кокковые формы. В воде встречаются разнообразные спорообразующие и неспорообразующие бактерии и специфические водные бактерии - водные вибрионы, нитчатые бактерии и др. В иле на дне водоемов обитают различные анаэробные бактерии. Среди бактерий, обитающих в воде и почве, имеются азотфиксирующие, нитрифицирующие, денитрифицирующие, расщепляющие целлюлозу бактерии. и др. В морях и океанах обитают бактерии, растущие при высоких концентрациях солей и повышенном давлении, встречаются светящиеся виды. В загрязненных водах и почве, кроме почвенных и водных сапрофитов, в большом количестве встречаются бактерии, обитающие в организме человека и животных,- энтеробактерии, клостридии и др.

Показателем фекального загрязнения обычно является наличие кишечной палочки. В связи с широким распространением бактерий и своеобразием метаболической активности многих их видов они имеют исключительно большое значение в круговороте веществ в природе. В круговороте азота участвуют многие виды бактерий - от видов, расщепляющих белковые продукты растительного и животного происхождения, до видов, образующих нитраты, которые усваиваются высшими растениями. Метаболическая активность бактерий обусловливает минерализацию органического углерода и образование углекислоты, возврат которой в атмосферу важен для поддержания жизни на Земле. Усвоение углекислоты из атмосферы производится зелеными растениями благодаря их фотосинтетической активности. Большая роль принадлежит бактериям в круговороте серы, фосфора, железа.

Сравнительно небольшая часть всех известных микробов способна вызывать заболевания человека и животных. Потенциальная способность бактерий вызывать инфекционные заболевания, являющаяся их видовым признаком, называется болезнетворностью или патогенностью. У одного и того же вида степень выраженности патогенных свойств может довольно широко варьировать. Степень патогенности штамма определенного вида бактерий называется его вирулентностью (см.). Среди бактерий имеются условно патогенные виды, болезнетворность которых зависит от состояния макроорганизма, внешней среды и др.

Генетика бактерий

Генетика бактерий - раздел общей генетики, изучающий наследственность и изменчивость у бактерий. Относительная простота организации бактерий, их способность расти в синтетических средах, быстрое размножение позволяют анализировать относительно редко возникающие изменения генома (см.) бактерий, составляющих многомиллиардные популяции, и проследить за их наследованием. Для этого используются специальные методы, обеспечивающие отбор из огромной популяции отдельных генетически измененных бактериальных клеток, передачу хромосомы или ее фрагментов от одних клеток (доноров) другим (реципиентам) с последующим генетическим анализом возникших рекомбинантов (см. Рекомбинация). Методы генетического анализа (см.) бактерий позволили изучить не только организацию бактериальной хромосомы, но и расшифровать тонкую структуру гена, а также установить функциональные взаимоотношения генетических единиц, составляющих отдельные бактериальные опероны (см.).

Развитие генетики бактерий связано с изучением бактериальной трансформации (см.), которое дало возможность установить роль ДНК как материальной основы наследственности. При изучении генетической трансформации у бактерий были разработаны методы экстракции и очистки ДНК, биохимические и биофизические методы анализа ее свойств. Это позволило не только изучать генетические изменения на клеточном уровне, но и сопоставлять эти изменения с изменением структуры ДНК. Таким образом, в совокупности с генетическими методами методы биохимического исследования генетического материала обеспечили возможность анализа закономерностей бактериальной генетики на молекулярном уровне.

Среди бактерий наиболее изученными в генетическом отношении являются кишечные палочки, у которых были открыты способы передачи генетического материала (хромосомы или ее фрагментов) от донора реципиенту, осуществляемые либо путем прямого скрещивания (см. Конъюгация у бактерий), либо с помощью бактериальных вирусов (см. Трансдукция). Другими микроорганизмами, обладающими такими же видами обмена генетическим материалом и по генетической характеристике приближающимися к кишечным палочкам, являются сальмонеллы.

Закономерности генетического обмена, установленные на кишечных палочках и сальмонеллах, присущи и ряду других микроорганизмов, играющих важную роль в инфекционной патологии. Феномены конъюгации и трансдукции обнаружены также у шигелл и некоторых других патогенных микроорганизмов, что позволяет осуществить генетический анализ факторов, обусловливающих их патогенность.

Для выяснения молекулярных механизмов, различных генетических феноменов значительный интерес представляют микроорганизмы, способные к генетической трансформации, при которой бактерии-реципиенты поглощают очищенную ДНК, экстрагированную из бактерий-доноров. В опытах трансформации выявляется генетическая активность изолированной, внеклеточной ДНК, что позволяет анализировать функциональную активность ДНК, подвергнутой различным воздействиям, изменяющим ее структуру как in vivo, так и in vitro.

Поэтому в молекулярно-генетических исследованиях широко используются трансформируемые виды бактерий, такие как Вас. subtilis, H. influenzae, Pneumococcus и др.

Свойства бактерий, как и любых других организмов, определяются набором присущих им генов. Запись генетической информации, закодированной в бактериальных генах, осуществлена на основе универсального триплетного кода (см. Генетический код). Яновским (С. Janofsky) были получены доказательства колинеарности (соответствия) между последовательностью нуклеотидов и последовательностью аминокислот в полипептиде и установлен in vivo состав отдельных триплетов, кодирующих включение различных аминокислот.

Набор генов, присущих бактериям, определяет их генотип (см.).Бактерии, обладающие одним и тем же генотипом, не всегда идентичны по своим свойствам; их свойства могут варьировать в зависимости от среды культивирования, возраста бактериальных культур, температуры выращивания и ряда других факторов внешней среды. Генотип определяет только потенциально присущие бактериальным клеткам свойства, выражение которых зависит от функционирования (активности) конкретных генетических структур. Хромосома бактерий включает 2 типа функционально различных генетических структур: структурные гены, детерминирующие специфичность белков, которые данная клетка способна синтезировать, и регуляторные гены, регулирующие активность структурных генов в зависимости от окружающих условий, в частности от наличия или отсутствия субстрата синтезируемого фермента либо от концентрации необходимого клетке соединения, от состояния генетического материала (репликация ДНК) и пр.

В активном состоянии структурные гены транскрибируются (см. Транскрипция), то есть становятся доступными для считывания генетической информации с помощью ДНК-зависимой РНК-полимеразы. Формирующаяся в процессе транскрипции информационная РНК (и-РНК) транслируется в соответствующий полипептид, структура которого закодирована в данных структурных генах.

По типу регуляции синтетические системы бактерий делят на 2 вида: катаболические и анаболические. Первые осуществляют утилизацию необходимой клетке энергии, вторые обеспечивают биосинтез соединений, необходимых бактериям.

Катаболическая система E. coli, осуществляющая расщепление лактозы на глюкозу и галактозу, детально изучена Жакобом и Моно (F. Jacob, J. Monod).

Ферменты этой системы (β-галактозидаза, галактозидпермеаза и галактозидтрансацетилаза) детерминируются соответствующими структурными генами. Рядом со структурными генами расположен регуляторный участок, так называемый оператор, «включающий» и «выключающий» считывание информации (транскрипцию) со структурных генов.

Другой регуляторной единицей данной системы является ген, контролирующий синтез репрессора - белка, способного соединяться с оператором. В присутствии репрессора структурные гены не транскрибируются РНК-полимеразой и синтеза соответствующих ферментов не происходит. Между оператором и геном-регулятором находится короткий участок ДНК - промотор - место посадки РНК-полимеразы. Добавленная к среде культивирования бактерий лактоза связывает репрессор, оператор оказывается свободным, и структурные гены начинают транскрибироваться, в результате чего происходит синтез ферментов. Таким образом, лактоза, являющаяся субстратом действия ферментов, выполняет функцию индуктора их синтеза.

Подобного рода регуляция свойственна и другим катаболическим системам. Синтез ферментов, индуцируемый субстратами их действия, называют индуцибельным.

Иного рода регуляция присуща анаболическим бактериальным системам. У этих систем ген-регулятор контролирует синтез неактивного репрессора-апорепрессора. При малых количествах конечного метаболита, контролируемого структурными генами данного биохимического пути (например, какой-нибудь аминокислоты), апорепрессор не соединяется с геном-оператором и не препятствует, следовательно, работе структурных генов и синтезу данной аминокислоты. В случае же избыточного образования конечного продукта последний начинает функционировать как корепрессор. Связываясь с апорепрессором, корепрессор превращает его в активный репрессор, соединяющийся с геном-оператором. В результате транскрибирование структурных генов и синтез соответствующих соединений прекращаются, то есть наблюдается репрессия системы. В процессе расхода клеткой избыточного конечного метаболита активный репрессор вновь превращается в апорепрессор, ген-оператор освобождается и структурные гены вновь приобретают активность, то есть происходит дерепрессия системы.

Таким образом, генетическим системам обоего рода - катаболическим (индуцибельным) и анаболическим (репрессибельным) - свойственна регуляция по типу обратной связи: накопление и расход конечного продукта регулирует его синтез анаболическими системами; в катаболических системах в роли регулятора выступает субстрат действия синтезируемых ферментов.

Сдвиги в ходе клеточных синтетических процессов, вследствие которых могут возникать ненаследуемые изменения свойств бактерий одного и того же генотипа, могут быть выражены в различной степени в зависимости от окружающих условий. Резко нарушенные условия существования могут приводить к выключению функции отдельных структурных генов или их гиперфункции, что в свою очередь может привести к значительным морфологическим изменениям, несбалансированному росту и, в конечном счете, к гибели клеток.

Комплекс свойств бактерий, выявляемых в данных условиях существования, называют фенотипом. Фенотип бактерий хотя и зависит от окружающей среды, но контролируется генотипом, так как характер и степень возможных для данной клетки фенотипических изменений определяется набором генов, то есть генотипом.

Как структурные, так и регуляторные гены бактерии локализуются в бактериальной хромосоме и в сумме образуют генетический аппарат бактерий. Помимо этого, бактерии могут нести внехромосомные генетические детерминанты - плазмиды (см.), которые, как правило, не являются жизненно необходимыми для клетки. Напротив, активация функций некоторых из них (например, бактериоцинов) губительна для бактериальных клеток, не несущих плазмид. Вместе с тем плазмидные элементы придают бактериям ряд свойств, представляющх большой интерес, с точки зрения инфекционной патологии. Так плазмидными детерминантами может быть обусловлена множественная устойчивость к лекарственным веществам (см. R-фактор), выработка альфа-гемолизина и других бактериальных токсинов.

Хромосома бактерий, как и клеток высших организмов, локализована в ядре.

В отличие от клеток высших организмов, бактериальное ядро лишено оболочки и именуется нуклеоидом. Количество нуклеоидов в бактериальных клетках варьирует в зависимости от фазы роста культуры: число нуклеоидов у кишечных палочек максимально в быстро размножающихся культурах, находящихся в логарифмической фазе роста. В стационарной фазе роста кишечные палочки содержат по одному нуклеоиду. Хромосома бактерий представляет собой молекулу ДНК, замкнутую в кольцо, с молекулярным весом порядка 1,5 - 2 X 109 дальтон.

Рис. 13. Схема последовательности передачи генетического материала при конъюгации E. coli, иллюстрирующая кольцевую структуру бактериальной хромосомы. Буквами обозначены различные гены. Правая стрелка - последовательность передачи генов (В,Г,Д,Е,А,Б) реципиенту донорным штаммом 1; левая стрелка - последовательность передачи генов (Д,Г, В,Б,А,Е) реципиенту донорным штаммом 2.

Кольцевое строение бактериальной хромосомы установлено тремя методами: ауторадиографическим, электронномикроскопическим и генетическим. В первом случае получены ауторадиограммы кольцевых структур бактериальной ДНК, во втором - электронномикроскопические изображения изолированной кольцевой ДНК, в третьем - установлены закономерности генетического обмена, объяснимые только кольцевым строением хромосомы. Это можно пояснить следующим условным примером. Допустим, что в процессе скрещивания бактерий (конъюгации) от одной бактерии к другой передаются гены, обозначенные буквами А, Б, В, Г, Д, Е. Один из использованных донорных штаммов Hfr (сокращение от английского выражения high frequency of recombination - высокая частота рекомбинации) имеет точку начала передачи хромосомы в области гена В. В этом случае наблюдается следующий порядок передачи генов: В, Г, Д, Е, А, Б. Второй штамм Hfr начинает передачу хромосомы с гена Д и передает ее в направлении, противоположном предыдущему. Гены в этом случае передаются в следующем порядке: Д, Г, В, Б, А, Е. Экспериментально показанное сохранение последовательности передачи генов при измененном порядке их переноса легко объясняется кольцевым строением хромосомы (рис. 13).

Методы, дающие возможность экспериментально осуществлять перенос генетического материала у бактерий (конъюгация, трансдукция и трансформация), позволили построить генетическую карту бактериальной хромосомы, отражающую относительную локализацию генов. С целью генетического картирования широко используется конъюгация, при которой реципиенту передаются большие участки бактериальной хромосомы, а иногда и вся хромосома донора. При конъюгационном картировании применяют различные подходы: устанавливают передачу отдельных генов по времени, выявляют сцепленную передачу генов, устанавливают частоту передачи генов, не подвергаемых селекции (неселективных), расположенных проксимально и дистально относительно селекционируемого гена, и т. п. Конъюгация, однако, в большинстве случаев не обеспечивает возможности достаточно точного картирования, так как при этом рекомбинация (см.) осуществляется на относительно протяженных участках хромосомы. Точное картирование производят с помощью трансдукции, при которой передаются более короткие фрагменты хромосомы бактерии, не превышающие 0,01 ее длины. Один из основных приемов трансдукционного картирования состоит в определении возможности котрансдукции (то есть совместной передачи) картируемого гена и гена, локализация которого в хромосоме известна. Наличие котрансдукции свидетельствует о близком (сцепленном) расположении анализируемых генов. С помощью трансдукции можно также устанавливать порядок расположения генов. Для этой цели используют специальный метод генетического анализа - так называемый тест трех точек, при котором анализ скрещиваний ведется относительно трех генов.

Трансформация для картирования используется сравнительно редко. Обработка реципиентных бактерий трансформирующей ДНК дает возможность передавать только очень небольшие участки бактериальной хромосомы. Вследствие этого с помощью трансформации можно анализировать лишь гены, которые составляют группы сцеплений.

Генетическая карта E. coli К-12, построенная на основе многолетних генетических исследований, проведенных в различных лабораториях мира, насчитывает в настоящее время несколько сот локализованных генов.

Рис. 14. Циркулярная генетическая карта, показывающая расположение генов в хромосоме E. coli. Гены обозначены символами, расшифрованными в табл. 3. Цифры на внутренних поверхностях окружностей обозначают единицы длины карты (время, в течение которого данный ген передается при конъюгации), выраженные в минутах (от 0 до 90 мин.).

На рис. 14 представлена генетическая карта E. coli, опубликованная в 1970 году Тейлором (A. L. Taylor) в журнале «Bacteriological Reviews» (США). Для удобства ориентации окружность генетической карты, схематически изображающая хромосому, разделена на отрезки - минуты, в сумме составляющие время, необходимое для передачи в процессе конъюгации всей хромосомы. Для кишечных палочек это время составляет около 90 минут. Размещенные по окружности символы обозначают соответствующие гены и расшифрованы в таблице 3, которая включает около 2000 бактериальных генов, функции которых в жизнедеятельности бактериальной клетки в значительной мере исследованы. Сведения о локализации генов на хромосоме бактерий позволяют решать конкретные задачи практической микробиологии. Они служат необходимой предпосылкой для изучения вирулентности и патогенности бактерий, их устойчивости к лекарственным препаратам, возможности создания аттенуированных штаммов и для других целей. В расположении генов кишечной палочки и сальмонелл существует выраженная гомология.

В ряде случаев гены (цистроны), контролирующие отдельные стадии синтеза конечного метаболита, расположены в одном участке бактериальной хромосомы. Последовательность расположения генов при этом соответствует последовательности использования детерминируемых ими промежуточных соединений в ходе синтеза конечного метаболита. В том же участке хромосомы, где расположены структурные гены, могут располагаться и регуляторные генетические единицы, составляющие в совокупности с соответствующими структурными генами оперон (см.). Примером таких оперонов являются группы генов, обеспечивающих синтез гистидина, триптофана и т. д.

В других случаях структурные и регуляторные гены одного и того же биохимического пути размещаются в различных областях бактериальной хромосомы, примером чего могут служить гены, контролирующие синтез метионина, расщепление арабинозы, синтеза пуринов и др.

Изучение генетического обмена у бактерий не ограничивается целью генетического картирования. Возможность такого обмена используется и при получении полезных для человека новых штаммов бактерий. В частности, рекомбинация между патогенными и непатогенными бактериями может быть использована для конструирования аттенуированных штаммов, то есть штаммов с ослабленной вирулентностью, пригодных для изготовления живых вакцин. Такие штаммы могут быть получены из патогенных бактерий (например, из дизентерийных бактерий) при замещении генетической области (или областей), определяющей их патогенность, соответствующими участками хромосомы непатогенных бактерий (например, кишечных палочек). Для создания аттенуированных штаммов необходимо не только обеспечить возможность генетического обмена, но и предварительно изучить генетические основы патогенности, вирулентности, иммуногенности и картировать определяющие их гены. Только при этом условии может быть осуществлено конструирование полноценных вакцинных штаммов, утративших только вирулентность, но сохранивших свойства, обеспечивающие иммуногенность.

Генетический обмен у бактерий осуществляется и в естественных условиях их обитания, следствием чего является рекомбинационная изменчивость бактерий, проявляющаяся в образовании атипичных форм. Это обстоятельство придает изучению рекомбинационного процесса практический интерес, так как механизм образования, патогенетическое и диагностическое значение атипичных форм - актуальнейшие вопросы инфекционной патологии.

Помимо фенотипической и рекомбинационной изменчивости, бактериям свойственна мутационная изменчивость, то есть изменчивость, обусловленная мутациями, представляющими собой структурные перестройки генов, полную или частичную их утрату (делеций), не связанные с рекомбинациями. Бактерии широко используются для изучения закономерностей мутационного процесса. Мутация (см.), то есть изменение генотипа,- явление, вызываемое действием мутагенных агентов. Они являются основой для проведения всех генетических исследований, так как изучение функции генов, их картирование и другие генетические задачи могут быть решены только с помощью соответствующих мутантов. Характер бактериальных мутантов, формирующихся под влиянием мутагенных агентов, не зависит от механизма действия мутагенов (см.). Создавшееся же на первом этапе развития бактериальной генетики представление об адекватности мутационной изменчивости бактерий используемым мутагенам, то есть о специфическом действии последних, оказалось ошибочным, так же как ошибочной оказалась концепция о спонтанном характере мутационного процесса. Указанное представление исходило из того, что при действии агентов, вызывающих гибель основной части бактериальной популяции, исследователи получали мутации, соответствующие примененному агенту. Так, например, действие сульфаниламидов сопровождалось выделением сульфамидорезистентных мутантов, действие фагов - выделением фагорезистентных мутантов и т. д. Работами Лурия (S. Luria), Дельбрюка (М. Delbruck), Ледерберга (J. Lederberg) и Ньюкомба (H. Newcombe) было показано, что формирование таких мутантов происходит до добавления губительно действующего агента, а последний играет лишь роль селекционирующего фактора. Мутационные изменения в бактериальных популяциях возникают во многих генах, но селекционирующие агенты отбирают лишь соответственные мутации. Так, например, в мутирующей популяции бактерий могут содержаться мутанты различного рода: ауксотрофы - неспособные синтезировать какие-либо необходимые клетке соединения; мутанты, утратившие или приобретшие способность ферментации отдельных углеводов; резистентные к антибиотикам и т. д. При высеве такой популяции на среду с антибиотиком немутировавшие особи, так же как особи, несущие мутации, не имеющие отношения к антибиотикоустойчивости, не дадут роста. Вырастут на такой среде только бактерии, имеющие мутации в гене, определяющем соответствующую резистентность. Это, однако, не означает, что происхождение антибиотикоустойчивых мутантов связано с воздействием селекционирующего агента. Причиной возникновения резистентных мутантов, как и мутантов, оставшихся невыявленными на среде с антибиотиком, являются мутационные события, совершившиеся до воздействия селекционирующего агента. В свою очередь это не означает, что селекционирующий агент не может обладать мутагенной активностью, но при наличии таковой он индуцирует мутации не только в генах, соответствующих механизму его действия, но и, как любой другой мутаген, в самых разнообразных генах, а селекционирует лишь соответственно измененные бактерии.

Несостоятельность концепции о спонтанном мутировании бактерий была опровергнута на том основании, что при испытании многочисленных химических соединений и физических агентов, возможно, действующих на обычно культивируемые популяции бакткрий, было установлено, что мутагенная активность свойственна чрезвычайно широкому кругу факторов, в том числе естественным метаболитам бактерий. Действие этих факторов не всегда поддается контролю, но объясняет причину возникновения так называемых спонтанных мутаций.

Согласно современной концепции, спонтанные мутации представляют собой явление того же порядка, что и экспериментально полученные мутации, именуемые индуцированными. Как те, так и другие, причинно обусловлены. Различия состоят лишь в том, что индуцируемые мутации возникают под влиянием специально примененных мутагенных агентов, агенты же, вызывающие спонтанные мутации, остаются невыясненными. Термин «спонтанные», таким образом, не отражает суть явления и применяется условно для обозначения мутаций, возникающих без специальных воздействий.

Мутации, обусловленные воздействием мутагенных агентов, возникают в результате изменения последовательности нуклеотидов ДНК, проявлением чего является утрата или изменение функции полипептида, кодируемого данным геном, или изменение свойств регуляторных единиц бактериального генома (оператор, промотор). По «протяженности» различают генные и хромосомные мутации. Первые затрагивают один ген, вторые распространяются более чем на один ген. Хромосомные мутации возникают в результате выпадения большого числа нуклеотидов (делеций). Генные мутации чаще являются точечными, то есть заключаются в замене, вставке или выпадении одной пары нуклеотидов ДНК. Различают простые и сложные замены азотистых оснований в ДНК - транзиции и трансверзии (см. Мутация).

Бактериям свойственны прямые и обратные мутации. Последние часто имеют супрессорный характер. Мутагенные действия на бактериальные клетки оказывают все известные мутагены. Наиболее часто применяемыми мутагенами в бактериологических генетических исследованиях являются ультрафиолетовые лучи, проникающая радиация, моно- и бифункциональные алкилирующие агенты, аналоги оснований и ряд других.

Исследования последних лет, осуществленные на бактериях, вскрыли наличие генетически детерминированных систем, обеспечивающих репарацию повреждений генетического материала (ДНК). Этими исследованиями начато новое направление в генетике и молекулярной биологии. Данные, полученные при изучении бактериальной репаративной активности, привели к пересмотру ряда представлений о механизмах действия мутагенных агентов, формировании, фиксации и фенотипическом выражении мутационных изменений.

Антигены бактерий

Антигены бактерий локализованы в жгутиках, капсуле, клеточной стенке, мембранах и других структурах клетки. Антигены бактерий- биологически активные компоненты клетки, определяющие ее иммуногенные, токсические и инвазивные свойства. Расшифровка химической структуры бактериальных антигенов, контроля их синтеза клеткой и локализации в ней, а также иммуногенной специфичности является теоретической основой для создания эффективных методов диагностики и специфической иммунопрофилактики бактериальных инфекций.

Распределение антигенов в бактериальной клетке изучают иммуноцитологическими методами - специфической капсульной реакцией по Томчику (J. Tomcsik), прямым и непрямым методом флюоресцирующих антител, способом антител, меченных ферритином, йодом, ртутью или ураном, с применением электронной микроскопии ультратонких срезов, а также с помощью выделения отдельных структур для их последующего иммунологического изучения. Для выделения антигенов из бактерий применяют механическое разрушение при помощи мелких стеклянных шариков, ультразвук, высокое давление, детергенты, лизоцим или бактериофаг. Растворимые антигенные комплексы извлекают из бактерий путем их обработки протеолитическими ферментами, горячей водой, трихлоруксусной кислотой, диэтил гликолем, фенолом, мочевиной, пиридином, этиловым эфиром и др. Растворимые антигены очищают градиентным ультра-центрифугированием с помощью колоночной хроматографии или препаративным электрофорезом. Высокоочищенные антигены получают из энтеробактерий, коклюшных микробов, стрептококков и др.

Среди антигенов бактерий различают типо-, видо-, группо- и родоспецифические, а также «неспецифические». Большинство типо- и группоспецифических антигенов локализовано в жгутиках, капсуле и клеточной стенке бактерий. Антигены мембран и внутриклеточных структур бактериальных клеток изучены недостаточно.

Жгутиковые антигены (Н-антигены) представляют собой белок (флагеллин) с молекулярным весом 20 000- 40 000, состоящий из альфа- и бета-полипептидных цепей. При аналитическом ультрацентрифугировании флагеллин образует один гомогенный пик с коэффициентом седиментации 1,5-1,68. При нагревании до t° 100° в сильно кислой или щелочной среде жгутиковые антигены инактивируются. Предполагают, что аминокислотный состав разных серотипов жгутиковых антигенов сальмонелл, эшерихий и других энтеробактерий различен и это определяет их типовую специфичность. На различии в специфичности жгутиковых антигенов построена классификация серотипов сальмонелл. Изолированные жгутики энтеробактерий, холерного вибриона и других бактерий реагируют как Н-антиген (см. Жгутики бактериальные), однако фракция жгутиков содержит всегда примесь О-антигена. Жгутики и флагеллин S- и R-форм Proteus mirabilis содержат общий и различающийся антигенные компоненты. Антигенная специфичность зависит от соединения и последовательности субъединиц флагеллина жгутиковой нити. Методом иммунодиффузии (см.) у Н-антигена выявляются два компонента. При помощи препаративных иммунохимических методов можно получить Н-антиген, очищенный от О-антигена. Очищенный Н-антиген не обладает протективной активностью в опытах на лабораторных животных. Растворимые жгутиковые антигены используют для приготовления эритроцитарных Н-диагностикумов.

Капсульные антигены (К-антигены) многих бактерий типоспецифичны и стимулируют специфический иммунитет (см.). Многие из капсульных антигенов являются полисахаридами или мукопептидами.

Капсульные антигены пневмококков - типоспецифические полисахариды, в изолированном виде обладают свойствами гаптенов (см. Гаптены) и обозначаются как растворимая специфическая субстанция (SSS). В капсуле возбудителя сибирской язвы имеются гаптен-пептид, а также антигены белково-полисахаридной природы, чувствительные к протеолитическим ферментам. Капсульный глутамиловый полипептид, обнаруженный у Вас. megaterium, обладает свойствами антигена, перекрестно реагируя с антигенами клеточной стенки этого же микроба. Капсульные антигены полисахаридной природы выявлены у микробов рода Acetobacter. Эти антигены перекрестно реагировали с антисыворотками к стрептококкам группы В и G, а также к пневмококкам 23-го типа. Перекрестная серол, реакция обусловлена наличием в антигенах общей детерминантной группы - L-рамнозы.

Установлены перекрестные реакции между капсульными полисахаридными антигенами менингококков группы А и Вас. pumilus, менингококками группы С и E. coli 016: NM, пневмококками типа III и E. coli К7 и др.

В капсуле (точнее микрокапсуле) энтеробактерий обнаружены полисахаридные антигены: Vi-антиген (см.) у S. typhi, S. paratyphi С, E. coli, E. ballerup, В(К)-антигены у эшерихий, К-антигены у клебсиелл. У нек-рых сальмонелл обнаружены капсульные антигены белковой природы, которые обладают протективными свойствами (S. typhimurium, S. adelaide, Citrobacter). Капсульные полисахаридные антигены К. pneumoniae обладают адъювантным эффектом (см. Адъюванты).

В клеточной стенке многих видов микробов выявлены типо-, группо-, видо- и родоспецифические антигены. Согласно схеме Краузе (R. М. Krause, 1963) клеточная стенка стрептококка содержит типоспецифические белковые антигены (М-субстанция) и группоспецифические антигены полисахаридной природы. М-антиген (насчитывается до 60 типов) является протективным антигеном; в частично очищенном виде предложен в качестве вакцины. Проведенная амер. учеными проверка вакцины, состоящей из частично очищенного М-антигена, показала, что препарат вызывал у части привитых детей ревматизм. По данным ряда авторов, М-антиген тесно связан с антигеном, перекрестно реагирующим с антигеном сердечной мышцы человека. Предполагают, что перекрестно реагирующий антиген и М-антиген являются разными детерминантами одной белковой молекулы. Обнаружено также, что между M-антигеном стрептококка первого типа группы А и системой HLA лимфоцитов человека имеется связь. Другим группоспецифическим антигеном клеточной стенки стрептококков является мукопептидный антиген, специфичность которого обусловлена N-ацетилглюко-замином (для стрептококков группы А) и N-ацетилгалактозамином (для стрептококков группы С). Группоспецифическим антигеном молочнокислых стрептококков является внутриклеточная тейхоевая кислота.

В клеточной стенке стафилококков сосредоточены видоспецифические антигены - белковый А-антиген в поверхностном слое стенки и тейхоевая кислота, которая в комплексе с мукопептидом составляет внутренний слой стенки. А-антиген - преципитиноген, обнаруженный у большинства штаммов Staphylococcus aureus, его мол. вес 13 200. Он обладает способностью вступать в неспецифическую реакцию с Fc-фрагментом иммуноглобулинов класса G сыворотки крови человека и некоторых животных. Тейхоевая кислота - специфический преципитиноген, состоящий из субъединиц полирибитолфосфата, к которому присоединены N-ацетил глюкоз амин (детерминантная группа) и D-аланин. Тейхоевая кислота обнаружена в клеточных стенках стрептококков, стафилококков, микрококков Вас. subtilis и молочнокислых бактерий. Установлено, что тейхоевая кислота, изолированная из стафилококков, обладает протективными свойствами. Из клеточных стенок Cl. botulinum типа А изолирован и очищен белковый термостабильный антиген, устойчивый к действию трипсина.

В клеточных стенках коринебактерий, нокардий, микобактерий и актиномицетов обнаружены видо- и родоспецифические антигены. В состав мукопептида клеточной стенки коринебактерий, нокардий и микобактерий входит арабиноза и галактоза, которые обусловливают перекрестную серологическую реактивность между штаммами этих групп. В клеточной стенке дифтерийного микроба выявлены два антигена: поверхностный типоспецифический белок и более глубоко расположенный группоспецифический термостабильный полисахарид. Сложный набор антигенов выявлен в клеточной стенке анаэробных коринебактерий методом радиоиммуноэлектрофореза. Главным компонентом клеточных стенок этих микробов оказался кислый полисахарид. Группоспецифические мукополисахаридные гаптены выявлены в клеточных стенках Вас. anthracis. Эти гаптены реагируют в реакции преципитации с аналогичными антигенами, изолированными из Вас. cereus. Типоспецифические антигены Вас. megaterium также локализованы в клеточной стенке.

О - антиген (эндотоксин) энтеробактерий локализован в промежуточном слое клеточной стенки и представляет собой комплексное соединение, состоящее из белка или пептида, полисахарида и липида. Липополисахарид (глюцидолипоидный комплекс), извлеченный смесью фенола с водой, имеет молекулярный вес 106-107, на 60-70% состоит из фосфорилированного полисахарида и на 20-40% - из липида (липид А жирных кислот). Молекулярный вес очищенного полисахарида равен 20 000-60 000. Полисахарид О-антигенов разных видов энтеробактерий построен по одному принципу и состоит из базисной структуры и боковых S-специфических цепей, являющихся детерминантными группами. Базисная структура (иначе R-липополисахарид) всех серотипов сальмонелл включает глюкозамин, 2-кето-З-дезоксиоктанат (КДО), L-глицеро-D-манно-гептозу, галактозу и глюкозу.

Известно 6 хемотипов R-липополисахаридов, выявленных у соответствующих R-мутантов (Ra, Rb, Rc, Rd1, Rd2 и Re), которые различаются по степени дефектности в химической структуре. В состав белковых цепей входят 6-дезокси- и особенно 3,6-дидезоксигексозы. S-специфические боковые цепи построены из повторяющихся олигосахаридов. O-факторы представляют собой часть или всю детерминантную группу О-антигена. Они классифицируются по схеме Кауферманна- Уайта с помощью перекрестных или гомологичных реакций агглютинации. Концевой сахар, обладающий наибольшим сродством с активным центром антитела, обозначают как иммунодоминантный сахар. О-фактор 2 (группа А) детерминируется иммунодоминантным сахаром паратозой, О-фактор 4 (группа В) - абеквозой, О-фактор 9 (группа D) - тивелозой и т. д. Иммунодоминантным сахаром Shigella dysenteriae является рамноза. Специфичность О-антигенного комплекса обеспечивается не только иммунодоминантным сахаром, но и последовательностью расположения сахаров в боковой цепи и характером хим. связей между отдельными сахарами. Первоначально в микробной клетке синтезируется базисная структура полисахарида, а затем боковые цепи. Липидная часть О-антигена (липид А) у всех энтеробактерий почти идентична. Липид А представляет собой длинную цепь жирных кислот, производных полифосфо-d-глюкозамина, он прочно связан с O-специфическим полисахаридом. При этом биосинтез молекулы полисахарида, а также всей молекулы О-антигена генетически детерминирован.

Изолированный О-антиген (липополисахарид) имеет ветвистую структуру, которая нарушается при обработке комплекса дезоксихолатом натрия; образуются так называемые гаптенные субъединицы, из которых, по-видимому, построен весь комплекс. Изолированные О-антигены токсичны, пирогенны, вызывают местный и общий феномен Швартцмана (см. Швартцмана феномен), некроз опухолевидной ткани, специфическую и неспецифическую резистентность, а также обладают иммуностимулирующей и иммунодепрессивной активностью. Предполагают, что токсическая активность О-антигенов обусловлена липидом А. Введение О-антигена животным сопровождается лейкопенией и тромбоцитопенией. О-антиген вызывает феномен толерантности, сопровождающийся заметным увеличением фагоцитарной активности. Помимо О-антигена, в клеточных стенках энтеробактерий обнаружены лабильные к нагреванию антигены, а также общие антигены.

В 1962 г. Кунин (С. Kunin) с соавторами впервые описали общий антиген энтеробактерий, который по специфичности отличается от О-антигена. Общий антиген, извлеченный из E. coli 014,- полисахарид, вызывает у кроликов продукцию специфических антител.

Липополисахарид, или липид А, вводимый животному вместе с общим антигеном, подавляет продукцию антител к общему антигену. Другой вид общего антигена, названный Горжинским и Бродхаге (О. О. Gorzynski, 1964; О. О. Brodhage, 1961, 1962) С-антигеном, обнаружен у E. coli и Sh. sonnei. У Sh. sonnei при помощи реакции гемагглютинации выявлен бактериальный агглютиноген (ВА), связанный с липополисахаридом. В 1969 году Энгельбрехт (E. Engelbrecht) сообщил еще об одном общем антигене у энтеробактерий - «алкогольфильном» факторе, который был получен из S. paratyphi А и В, S. bareilly. Предполагается, что «алкогольфильный» антиген - полисахарид. В клеточных стенках у холерного вибриона локализован специфический альфа-антиген, у возбудителя коклюша - белковый протективный антиген и гистаминсенсибилизирующий фактор, у чумного микроба - антиген, извлекаемый смесью фенол - вода, и следы фракции I.

Протективная активность изолированных клеточных стенок продемонстрирована в опытах со стафилококками, стрептококками, туляремийных микробом, возбудителем чумы, энтеробактериями, коклюшным микробом, микобактериями, холерным вибрионом, бруцеллами. Из клеточных стенок указанных микробов извлекают растворимые антигены, обладающие протективной активностью. Клеточные стенки многих грамположительных и грамотрицательных микробов вызывают у лабораторных животных образование гранул, дерматиты, гепатиты, хроническик кардиты и артриты. В опытах in vitro клеточные стенки стимулируют выделение лизосомальных энзимов, обладают цитотоксическим эффектом, ингибируют флюцитоз бактерий и рост клеток.

Таким образом, поверхностные структуры многих бактерий содержат типо-, группо-, видо- и родоспецифические антигены, а также общие антигены для разных видов микробов. Многие из перечисленных антигенов имеют важное значение в патогенезе заболеваний и формировании специфического иммунитета.

Антигены мембран и внутриклеточных структур. В мембранах бактерий сосредоточены специфические антигены. Так, антигены цитоплазматической мембраны Вас. megaterium отличаются по своей специфичности от антигенов клеточной стенки.

Изучение антигенного строения мембран Micrococcus lysodeicticus показало, что на поверхности цитоплазматической мембраны расположено 8 антигенов. Во фракции мембран E. coli 0111: К 4: Н12 и других энтеробактерий обнаружены О- и Н-антигены, а также неидентифицированные антигены. Установлено, что 0-антиген мембран идентичен О-антигену клеточных стенок. Н-антиген мембран идентичен Н-антигену изолированных жгутиков, так как базальная часть жгутика прикреплена или расположена на внутренней поверхности цитоплазматической мембраны. Поэтому Н-антигенная активность мембран обусловлена антигенной активностью базальной части жгутика. Белки, извлеченные из мембран микоплазм разных серол, групп, обладали специфической антигенной активностью. Из коклюшного микроба, разрушенного ультразвуком, выделена палочковидная структура с коэффициентом седиментации 22s, которая обладает протективными свойствами (223-антиген). Этот антиген, вероятно, локализован в мембранах. Описан новый класс бактериального антигена - липотейхоевая кислота, которая может быть изолирована из стрептококков, молочнокислых бактерий и некоторых бацилл. Липотейхоевая кислота локализуется на поверхности цитоплазматической мембраны и является группоспецифическим антигеном. Липотейхоевая кислота построена из 25-30 глицерофосфатных остатков и липидного компонента (гликолипида). Часть глицерофосфатных остатков замещена глюкозой и D-аланином. Мембранные антигены большинства патогенных бактерий изучены мало.

Цитоплазматическая фракция бактерий отличается определенным своеобразием: в ней наряду с компонентами цитоплазмы (рибосомы, гранулы, фрагменты эндоплазматического ретикулума, клеточный сок) присутствуют компоненты ядра (ДНК и, возможно, ядерные белки).

Поэтому, подвергая цитоплазматическую фракцию иммунол, анализу, иногда трудно сказать, за счет каких антигенов выявлена активность.

Так называемая суммарная фракция цитоплазмы энтеробактерий, коклюшного микроба, кокков и других бактерий обладает слабой антигенной активностью. В цитоплазме ряда бактерий обнаружены общие антигены: между штаммами рода Nocardia и Streptomyces, Nocardia и Мусоbacterum. Идентичные цитоплазменные антигены выявлены у микобактерий, актиномицетов и коринебактерий. Однако в цитоплазме чумного микроба обнаружены специфические антигены: фракция I, «мышиный» токсин, VW-антиген и антигенный комплекс, извлекаемый трихлоруксусной обработкой. Перечисленные антигены могут иметь важное значение в патогенезе инфекции. На модели чумного микроба показано, что антигенные комплексы, получаемые методом фенол- вода, и антигенный комплекс, извлекаемый трихлоруксусной кислотой, являются разными антигенами и, возможно, локализованы в разных структурах. Из ультразвукового лизата шигелл Зельтман (G. Seltman, 1975) изолировал антиген, двигающийся, к аноду (АТА), который оказался общим для многих энтеробактерий. Этот антиген белковой природы, вероятно, расположен внутри клетки.

Выявлены антигены в рибосомах: в течение 1960-1963 годы было установлено, что в рибосомах бактерий локализованы три типа антигенов, общие для многих бактерий (по-видимому, РНК), общие для ограниченного числа видов (белок) и специфические для каждого вида. В 1967-1975 годы показано, что рибосомальные фракции, полученные из энтеробактерий, листерий, микобактерий, коклюшных микробов, холерных вибрионов, стафилококков, обладают протективными свойствами в опытах на лабораторных животных. При этом доказано, что протективная активность рибосом не связана с примесью антигенов клеточной стенки. Из рибосомальной фракции холерного вибриона методом ионообменной хроматографии изолирован белок, который обладал специфическими протективными свойствами, а очищенные рибосомы не вызывали защиты у животных. Однако одни исследователи предполагают, что протективная активность рибосом связана с РНК, другие - с белком, а третьи считают, что к изолированным рибосомам «прикреплен» какой-то углевод, возможно, клеточной стенки, который обладает специфическими свойствами антигена. Механизм защитного действия «рибосомальных» вакцин не выяснен.

Исследованиями Риби (E. Ribi) с сотр. было продемонстрировано наличие в цитоплазме энтеробактерий низкомолекулярного полисахарида, который по антигенным свойствам и хим. составу близок к О-антигену клеточной стенки. Этот полисахарид описан как плазматический. Его антигенная активность проявляется лишь тогда, когда он соединен с О-антигеном. Однако такой комплекс не вызывает образования антител у кроликов. Плазматический полисахарид был обозначен как нативный гаптен, построенный из «линейных молекул» (частиц), молекулярный вес которых равен 163 000, диаметр - 1,6 нм, длина - 130 нм. Молекулы нативного гаптена, в отличие от О-антигена, не образуют мицеллярных структур. Высказано предположение, что нативный гаптен является предшественником О-антигена клеточной стенки.

Многими исследователями установлено, что бактериальная ДНК обладает антигенными свойствами. Препараты бактериальной ДНК реагируют как антигены с гомологичной и гетерологичными сыворотками. Показана перекрестная серол, реактивность между ДНК бактерий и ДНК клеток макроорганизма.

Некоторые исследователи считают, что ДНК и нуклеопротеиды бактерий стимулируют аутоиммунный процесс.

Таким образом, бактерии имеют сложную мозаику антигенов, которые распределены почти во всех структурах и органелл ах. Одни из этих антигенов более активны, другие - менее. Наиболее важен с практической точки зрения вопрос выявления и выделения протективных антигенов в очищенном виде с целью изготовления эффективных вакцин и диагностических препаратов.

Библиогр.: Анатомия бактерий, пер. с англ., под ред. Г. П. Калины, М., 1960; Иерусалимский Н.Д. Основы физиологии микробов, М., 1963, библиогр.; Метаболизм бактерий, пер. с англ., под ред. В.А.Шорина, М., 1963, библиогр.; Многотомное руководство по микробиологии, клинике и эпидемиологии инфекционных болезней, под ред. H. Н. Шукова-Вережникова, т. 1, с. 58 и др., М., 1962; Пешков М. А. Цитология бактерий, М.- JI., 1955, библиогр.; он же, Сравнительная цитология сине-зеленых водорослей, бактерий и актиномицетов, М., 1966; Роуз Э. Химическая микробиология, пер. с англ., М., 1971, библиогр.; Станиславский Е. С. Бактериальные структуры и их антигенность, М., 1971, библиогр.; Bergey’s manual of determinative bacteriology, ed. by R. E. Buchanan a. N. E. Gibbons, Baltimore, 1975, bibliogr.; Annual Review of Microbiology, v. 1-26. Stanford, 1957-1972; Bacteria, ed. by I. C. Gunsalus a. R. Y. Stani-er, v. 1-5, N. Y.-L., 1960-1964; Helms tetter C.E. Sequence of bacterial reproduction, Ann. Rev. Microbiol., v. 23, p. 223, 1969, bibliogr.; К a e m p-fer R. a. Meselson M. Studies of ri-bosomal subunit exchange, Cold Spr. Harb. Symp. quant. Biol., v. 34, p. 209, 1969; Korn E.D. Cell membranes, structure and synthesis, Ann. Rev. Biochem., v. 38, p. 263, 1969; N о m u r e M. Bacterial ribosome, Bact. Rev., v. 34, p. 49, 1970; О s-born M. J. Structure and biosynthesis of the bacterial cell wall, Ann. Rev. Biochem., v. 38, p. 501, 1969; Replication of DNA in microorganisms, Cold Spr. Harb. Symp. quant. Biol., v. 33, 1968; R y t e r A. Association of the nucleus and membrane of bacteria, Bact. Rev., v. 32, p. 39, 1969; T о p 1 e у W. W. a. Wilson G. S. Principies of bacteriology and immunity, v. 1 - 2, Baltimore, 1964.

Генетика Б. - Браун В. Генетика бактерий, пер. с англ., М., 1968, библиогр.; Жакоб Ф.иВольман Э. Пол и генетика бактерий, пер. с англ., М., 1962; Захаров И. А. и Квитко К. В. Генетика микроорганизмов, JI., 1967; Сборник методик по генетике микроорганизмов, под ред. Р. Клауса и У. Хейса, пер. с англ., М., 1970, библиогр.; С к а-вронскаяА.Г. Мутации у бактерий, М., 1967, библиогр.; T а у 1 о г А. Z. а. T г о t-t e r C. D. Linkage map of Escherichia coli strain K-12,Bact. Rev., v. 36, p. 504, 1972, bibliogr.; CurtissR. Bacterial conjugation, Ann.Rev. Microbiol.,v. 23, p. 69, 1969; Hartman P. E., Hartman Z.a. Stahl R. Classification and mapping of spontaneous and induced mutations in the histidine operon of Salmonella, Advanc. Genet., v. 16, p. 1, 1971, bibliogr.; Proceedings of the 12-th international congress of genetics, v. 3, Tokyo, 1968; Sanderson Κ. E. Genetics of the Enterobacteriaceae, Advanc. Genet., v. 16, p. 35, 1971, bibliogr.

Антигены бактерий - Адо А. Д. и Федосеева В. Н. Локализация в клетках Neisseria perflava и Klebsiella pneumoniae антигенов, общих (перекрестно реагирующих) с тканями бронхо-легочного аппарата человека, Бюлл. Эксперим, биол, и мед., т. 81, Кя 3, с. 349, 1976; Гольдфарб Д. М. и Замчук Л.А. Иммунология нуклеиновых кислот, М., 1968, библиогр.; М и х а й-л о в И. Ф. Флюоресцирующие антитела и методы их применения, М., 1968, библиогр.; Петросян Е. А. Комплексные антигены тифо-паратифозной группы бактерий, М., 1961, библиогр.; Станиславский Е. С. Бактериальные структуры и их антигенность, М., 1971, библиогр.; H e у m e r В., S p a n e 1 R. a. Haferkamp O. Biologische Aktivitat bakterieller Zellwande, Immun. u. Infekt., Bd 3, S. 232, 1975; Luederitz O. a. o. Isolation and chemical and immunological characterization of bacterial lipopoly-saccharides, в кн.: Microbial toxins, ed. by Т. C. Montie, v. 4, p. 145, N. Y., 1971, bibliogr.; Owen P. a. Salton M. Antigenic and enzymatic architecture of Micrococcus lysodeikticus membranes established by crossed immunoelectrophoresis, Proc. nat. Acad. Sci. (Wash.), v. 72, p. 1711, 1975; Robbins J. B. a. o. Gross-reacting bacterial antigens and immunity to disease caused by encapsulated bacteria, в кн.: Immun. syst. a. infect. Dis., ed. by E. Ne-ter a. F. Milgrom, p. 218, Basel a. o., 1975; Wicken A. J. a. Knox K. W. Lipoteichoic acids, a new class of bacterial antigen, Science, v. 187, p. 1161, 1975.

B. С. Левашев; А. Г. Скавронская (ген. с табл.); Д. М. Гольдфарб (бакт. табл.). E. С. Станиславский.

На этапе своего становления, то есть в XVII-XVIII столетиях, микробиология развивалась таким образом, что все найденные организмы описывались без введения какой-либо логичной классификации. В тот период времени микроорганизмы микробиология описывала морфологическим способом. Существенные изменения произошли в XIX столетии. К этому моменту ученые накопили довольно объемную базу знаний, а также нашли большое разнообразие микроорганизмов, грибов. Чтобы как-то ориентироваться в этом обилии информации, потребовалась логичная структура. Таковая была предложена в 1923 году, когда издали определитель бактерий. Это была первая международная работа, ставшая базовой для развития науки микробиологии.

Основные положения

Единая классификация официально была введена на международном уровне в 1980 году. Она основана на разработанной Берги системе. Ключевые ступени: царство, класс, порядок, семейство, род, вид. Последний - это самый значимый для системы деления на классы уровень. Он объединяет организмы, имеющие ряд сходств: морфология, происхождение, физиология. Кроме того, анализируются особенности обмена веществ. Если он оказывается в высокой степени сходен, тогда микроорганизмы можно объединить в вид.

Виды микроорганизмов можно подразделить на две категории:

• эукариоты;
• прокариоты.

Вторая группа включает в себя бактерии, то есть организмы, лишенные оформленного ядра. ДНК включает в себя все данные, необходимые для нормального наследования признаков. Молекула ДНК находится в клеточной цитоплазме.

Уровнем ниже

Вид - это не самый низкий уровень классификации микроорганизмов. Внутри него существуют:

• морфовары, которым свойственна особенная морфология микроорганизмов;
• биовары, которые отличаются биологией;
• хемовары, которым свойственна немного иная активность ферментов;
• серовары, выделяемые в группы в зависимости от антигенной структуры;
• фаговары, классификация которых основана на восприимчивости фагов.

Все учтено и записано

Чтобы классификации микроорганизмов по биологическим группам была стандартизированной, на международном уровне ввели систему обозначений для разных групп. В основу положена идея бинарности, то есть применяется двойная номенклатура. Название начинается с имени рода - это слово всегда пишут с заглавной буквы. А вот второе слово начинают с маленькой, оно описывает принадлежность к виду. Например: Staphylococcus aureus.

Микробиологи-медики: чему уделим особенное внимание?

Традиционно патогенные микроорганизмы - тема, которая привлекает медиков, занимающихся микробиологией. В фокусе внимания различные представители - вирусы, бактерии, хламидии и другие. Микробы преимущество для человеческого глаза неразличимы, и, чтобы разглядеть их, нужно применять специальную технику - микроскопы, многократно увеличивающие исследуемый объект.

Интересные для медицины и науки патогенные микроорганизмы включают в себя неклеточные вирусы и такие микроскопические формы жизни, которые состоят из большого числа клеток. Это различные опасные для человека (и не только) грибы, хламидобактерии, водоросли.

Базовые термины: бактерии

Что такое микроорганизмы? Для разных категорий есть разные объяснения, позволяющие разобраться, что собой представляет заинтересовавшая группа форм жизни. Например, бактериями принято именовать такие организмы, в состав которых входит лишь одна клетка. Особенность бактерий - отсутствие хлорофилла. Классификация микроорганизмов этой группы - прокариоты. Некоторые бактерии всего лишь 0,1 микрометра, но некоторые достигают 28 микрометров. Формы этих организмов зависят от среды обитания. Она определяет размеры.

Все известные науке бактерии принято делить на группы:

• кокки (шары);
• палочки (бациллы, клостридии);
• нити (хламидобактерии);
• вьющиеся (спириллы и т. д.).

Классификации микроорганизмов: подробнее

Коккам характерна форма сферы, эллипса, боба, шара. Также встречается форма ланцета. Виды микроорганизмов этой группы: дипло-, микро-, стрепто-, тетра-, стафилококки, сарцины.

Микрококкам свойственна хаотичность клеток, но это условие не обязательно: встречают такие, в состав которых входит лишь одна или две клетки. Все эти микроорганизмы считаются сапрофитами. Их среда обитания - воздух, вода.

Диплококки при делении формируют парные кокки. Типичный представитель - провоцирующий менингит менингококк, а также источник гонореи гонококк. Как и диплококки, в одной плоскости могут делиться витые стрептококки, но их особенность - наличие разноразмерных цепочек. Эти микробы и бактерии опасны, возбуждают разнообразные заболевания, даже приводящие к летальному исходу.

А что еще есть?

Что такое микроорганизмы-тетракокки? Уже само название говорит об отличительной черте таких форм жизни: тетра на латыни означает «четыре». Такие микроорганизмы способны делиться в плоскостях, перпендикулярных друг относительно друга. Для человека они относительно безопасны: пока известно мало заболеваний, провоцируемых тетракокками.

Известны кокки сардины. Им свойственно деление в трех плоскостях, перпендикулярных относительно друг друга. Визуально организмы похожи на тюки. В их составе обычно 8-16 клеток. Среди обитания этих микроорганизмов - воздух. Провоцируемые ими человеческие болезни науке не известны, поэтому на текущий момент считается, что их не существует.

А вот значение микроорганизмов-стафилококков учеными было открыто довольно давно - они провоцируют кожные болезни, поражающие не только человека, но и различных животных. Визуально организмы подобны гроздям. Деление доступно в разных плоскостях. Обычно обитают скоплениями, форма - хаотическая.

Палочки

По классификации микроорганизмов к этой группе принадлежат бактерии, бациллы, клостридии. Обычный размер - 1-6 мкм длиной, 0,5-2 мкм шириной. Палочки-бактерии спор не формируют. Известны опасные формы: кишечная, туберкулезная, дифтерийная и прочие. Бациллы, клостридии - микробы, создающие споры. Они провоцируют разнообразные опасные (даже смертельные) инфекции: сибирская язва, сенная лихорадка, столбняк.

Выделяют короткие палочки, длинные, а также с разными концами: круглыми, острыми. Описание морфологии микроорганизмов предполагает изучение взаимного расположения. Этот параметр стал основой разделения на три группы:

• попарное расположение;
• бессистемные;
• стрептобациллы, стрептобактерии.

Первые провоцируют пневмонию, вторая группа вызывает очень большой спектр болезней, а третья - сибирскую язву, мягкий шанкр.

Реже можно наблюдать бактерии, на концах которых есть утолщение, напоминающее формой булаву. Действующая классификация микроорганизмов предполагает отнесение их к палочкам. Отличительная особенность этой группы - палочка может спровоцировать дифтерию, а ряд подвидов - лепру, туберкулёз.

Витые микроорганизмы

Вибрионы, принадлежащие к этой группе, изгибаются на 14 витков и по форме похожи на символ «,». К ним причисляют широко распространённые вибрионы: холерный, водный. Спириллы, относящиеся к витым микроорганизмам, отличаются изгибом в один либо несколько витков. Наука знает лишь один опасный человеку вид - он провоцирует содоку. Это заболевание можно получить, если укусит грызун (например, крыса).

Спирохеты представляют собой похожие на штопор микроорганизмы длиной 0,3-1,5 мкм, шириной 7-500 мкм. Сюда причисляют сапрофитов, некоторые другие опасные виды. Питательные среды микроорганизмов - грязные воды, мертвые массы. Известны три вида, провоцирующие болезни у человека: бореллия, лептоспира, трепонема.

Общие особенности витых микроорганизмов

Все описанные выше группы полиморфны. Это означает, что внешняя среда определяет форму, размер. Значимыми являются:

• температура;
• влияние лекарственных препаратов;
• наличие дезинфекции.

Лабораторное диагностирование обязывает учитывать способность бактерий меняться. Также эти особенности влияют на разработку, производство препаратов, используемых в профилактике и лечении заболеваний.

Не убежать

Академик Омельянский однажды написал, что микробы невидимы, но они всегда рядом с человеком, как друзья и враги. Эти микроскопические формы жизни наполняют воздух, почву, воду, находятся в человеческом теле, в любом животном. Некоторые могут использоваться с пользой для человека, что особенно актуально для пищевой промышленности, но многие смертельно опасны, так как провоцируют болезни. Именно из-за микробов может портиться еда.

Впервые микробы были обнаружены в XVII столетии, когда удалось сконструировать линзы с 200-кратным увеличением. Микромир поразил ученого, впервые увидевшего его, - голландца Левенгука. Спустя некоторое время исследования были продолжены Пастером, выявившим специфику жизнедеятельности микроскопической жизни. Например, удалось объяснить брожение спирта, некоторых человеческих заболеваний. Тогда впервые была изобретена вакцина. Первыми болезнями, побежденными таким методом, стали сибирская язва, бешенство.

Отличительные особенности: микробы

К этой группе относят организмы (большей частью состоящие из одной клетки), увидеть которые можно лишь при большом увеличении. Размеры большей части известных науке микробов - в границах от тысячной доли миллиметра до тысячной доли микрометра. Видов этой формы жизни - огромное количество. Разные микробы могут существовать в разных средах. Выделяют категории:

• бактерии;
• фаги;
• грибы;
• дрожжи;
• вирусы.

Также существует классификация:

• микоплазмы;
• риккетсии;
• протозои.

Микроскопическая жизнь: образование спор

Процесс непростой, споры совсем не такие, как клетка бактерии. Споры защищены плотной оболочкой, внутри которой - небольшой объём жидкости. Спора не нуждается в питательном веществе, замирают процессы размножения. Такая форма жизни существует долгое время в самых неприятных условиях: минусовых температурах, в жаре или высушивании. Некоторые споры жизнеспособны десятилетиями, веками. Такими опасными считаются микроорганизмы, провоцирующие столбняк, сибирскую язву и ботулизм. Как только среда становится комфортной для существования, спора разрастается и начинает размножаться.

Бактерии: строение

Обычная клетка бактерии состоит из оболочки и слизистого покрытия, зачастую формирующего капсулу. Внутри - цитоплазма, защищенная мембраной. Цитоплазма - не имеющий цвета белок в коллоидной форме. Внутри цитоплазмы - рибосомы, ядро, ДНК. Здесь клетка запасает питательные компоненты.

Существуют способные двигаться бактерии. Для этого природа наделила их тонкими нитями, называемыми жгутиками. Жгуты вращаются, что проталкивает бактерию на новое место обитания. У некоторых это пучки, у других одиночные ниточки. Есть бактерии, у которых жгуты расположены по всей поверхности. Чаще всего жгуты наблюдаются у палочек, витых форм. А вот кокки жгутиков в основной массе лишены, поэтому этот вид микроскопической жизни неподвижен.

Размножение - деление. Некоторые делятся каждые 15 минут, поэтому рост колонии стремителен. Чаще всего это наблюдается в пище, обогащенных питательными компонентами веществах.

Это довольно специфическая, ни на что не похожая группа микроскопической жизни. Известные науке вирусы имеют размер от 8 до 150 нм. Разглядывают их лишь через систему современного увеличения - электронный микроскоп. В составе некоторых - белок, кислота. Микроскопические организмы провоцируют многие заболевания, среди них - корь, гепатит. Поражают животных, инициируя чуму, иные нарушения, включая очень опасный ящур.

Известные науке вирусы бактерий обозначают термином «бактериофаги», а вот против грибов работают «микофаги». Первых можно найти везде, где встречается микроскопическая жизнь. Они провоцируют гибель микроба, поэтому используются в лечебных, профилактических целях, эффективны при инфекциях.

Риккетсии и грибы

Грибы - это тоже очень интересная группа микроорганизмов. Их особенность - отсутствие хлорофилла. Такая форма жизни не способна продуцировать органику, но нуждается в ней, чтобы существовать. Это определяет субстраты, на которых могут выживать грибы: среда должна быть богата питательными компонентами. Грибы поражают человека, провоцируют болезни насекомых, животных, даже растений. Именно они взывают самые неприятные болезни привычной нам картошки - рак, фитофтору.

Грибные клетки состоят из вакуоли, ядра. Визуально сходны с клетками растений. Форма: длинные ветви. Клетка состоит из сплетенных меж собой ниточек, именуемых учеными гифами. Гифы - строительный материал для грибницы, состоящей из клеток (с 1-2 ядрами). Впрочем, известны мицелии, представляющие собой одну клетку с большим количеством ядер. Такие называются неклеточными. Грибница - база для роста плодового тела. Впрочем, известны такие грибы, которые состоят из одной клетки и не нуждаются в мицелии.

Грибы: особенности

Науке известны разные способы размножения грибов. Один из них - деление гиф, то есть вегетативный метод. Преимущественно грибы размножаются спорами, причем деление бывает половым, бесполым. Споры могут выживать в самых агрессивных средах столетиями. Спелые споры перед прорастанием «путешествуют» на большие расстояния, используя носителей. Как только спора оказывается в богатой питательными компонентами среде, она прорастает, появляются нити, мицелий.

Многие известные науке грибы принадлежат к категории плесневых. В естественных условиях встречаются в самых разных местах. Особенно охотно микроорганизмы прорастают на пище. Разглядеть их несложно - появляется цветной налет. Наиболее часто в быту человек сталкивается с мукоровыми грибами, формирующими белую, довольно пушистую массу. Если овощи покрылись «мягкой» гнилью, вероятно, здесь появился ризопус. А вот если тонкая пленка на грушах, яблоках, тогда причина, вероятно, в ботритисе. Довольно часто плесень провоцируется микроорганизмами пенициллиум.

Опасность и польза

Грибы не просто портят продукты, но отравляют. На это способны микроорганизмы, продуцирующие микотоксины: фузариум, аспергиллус.

Впрочем, известны полезные человеку грибы. Они довольно широко используются в изготовлении лекарства, продуктов питания. Так, пенициллиум незаменим при изготовлении пенициллина - антибиотика, используемого при широком спектре заболеваний. Не обойтись без него и при изготовлении благородных, дорогих сыров - рокфор, камамбер. Аспергиллус необходим для ферментных средств, применяется при изготовлении лимонной кислоты.

Бактерии-грибы

Еще одна интересная группа микроскопических организмов, обнаруженная учеными - это актиномицеты. Они обладают некоторыми свойствами грибов, но в то же время имеют признаки бактерий. С первыми их связывает метод размножения, наличие грибницы, гифов. Общие черты с бактериями - особенность строения, биохимия.

Дрожжи

Наконец, дрожжи - это такие микроскопические организмы, которые состоят из одной клетки. Дрожжи не могут двигаться, разрастаются до 10-15 мкм. Преимущественно они овальные, круглые, но встречаются и в форме палочек, серпов. Изредка даже попадаются сходные по форме с лимонами. Клеточное строение сходно со свойственным грибам, есть вакуоль, ядро. Дрожжи делятся, образуют споры, размножаются почкованием.

В природных условиях встречается большое разнообразие дрожжей. Они живут на растениях, есть в почве, пище, отходах - везде, где есть сахар. В пище дрожжи вызывают порчу, так как продукты киснут, начинают бродить. Есть и такие формы, которые продуцируют углекислый газ, спирт из сахара. Они активно применяются человеком уже долгое время для изготовления спиртных напитков. Есть и опасные для здоровья человека виды дрожжей - такие провоцируют кандидоз. И по сей день борьба с пободными грибками представляет собой большую сложность, а кандидоз в некоторых формах может приводить даже к летальному исходу (например, системный).